miR-21-5p和miR-155-5p在百草枯中毒患者血清中的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、研究背景
　　百草枯是一種高效能的、有機(jī)雜環(huán)類除草劑，可經(jīng)皮膚、呼吸道及消化道吸收造成急性中毒。百草枯中毒是急診急救領(lǐng)域常見(jiàn)的一個(gè)疾病，隨著百草枯農(nóng)藥的廣泛應(yīng)用，百草枯中毒的發(fā)病率呈現(xiàn)逐年上升的趨勢(shì)，但目前臨床上尚缺乏特效治療方法，有報(bào)道顯示其病死率高達(dá)50％～70％[1]。百草枯中毒之后，會(huì)出現(xiàn)多個(gè)臟器功能的損害，導(dǎo)致百草枯中毒患者死亡的最主要原因是肺損傷，同時(shí)肺損傷也是百草枯中毒最嚴(yán)重和最突出的臟器功能受損［2,3］，早期主要

2、表現(xiàn)為急性肺損傷(acute lung injury，ALI)，甚至出現(xiàn)急性呼吸窘迫綜合征(acute respiratory distress syndrome，ARDS)，晚期表現(xiàn)為肺泡內(nèi)和肺間質(zhì)的纖維化。百草枯毒性強(qiáng)，中毒后預(yù)后差，病死率極高，探討影響百草枯診斷和預(yù)后的相關(guān)因素，對(duì)判斷預(yù)后、指導(dǎo)治療具有重要意義。
　　微小RNAs(MicroRNAs)又稱為miRNAs，是一類長(zhǎng)度約19～25個(gè)核苷酸的小分子 RNA，其廣泛

3、的存在于動(dòng)物、植物和病毒等自然界生物體中，是一類重要的轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)基因，在細(xì)胞增生、分化、凋亡等過(guò)程中具有調(diào)節(jié)作用[4],并且可在血清中穩(wěn)定表達(dá)[5]。近年來(lái)，miR-21-5P和miR-155-5P在炎癥反應(yīng)、肺損傷和肺纖維化等病理生理的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中的調(diào)控機(jī)制研究得到了廣泛的關(guān)注[6]，然而對(duì)于miR-21-5P和miR-155-5P與百草枯中毒的關(guān)系方面尚缺乏臨床病例研究。本研究采用實(shí)時(shí)熒光定量反應(yīng)（RT-PCR）檢測(cè)百草枯中毒患

4、者血清中miR-21-5P和miR-155-5P的相對(duì)表達(dá)量，結(jié)合臨床相關(guān)指標(biāo)，探討 miR-21-5P和miR-155-5P對(duì)百草枯中毒診斷及預(yù)后的指導(dǎo)意義。
　　目的：
　　研究百草枯中毒患者血清中 miR-21-5P和miR-155-5P的表達(dá)情況，結(jié)合臨床相關(guān)指標(biāo)，探討其對(duì)百草枯患者診斷、病情嚴(yán)重程度及預(yù)后的影響。
　　方法：
　　選擇2014年11月至2015年8月我院收治的102例百草枯中毒患者，按入

5、院時(shí)尿百草枯濃度分為3組:輕型（尿百草枯濃度＜10μg/ml）32例，中型（尿百草枯濃度10-30μg/ml）42例，重型（尿百草枯濃度＞30μg/ml）28例，并選取健康人30例做對(duì)照組。詳細(xì)的記錄患者的姓名、性別、年齡、服毒劑量、中毒距就診的時(shí)間、中毒距洗胃的時(shí)間及28d預(yù)后等臨床資料，同時(shí)記錄患者入院時(shí)的尿百草枯濃度、白細(xì)胞計(jì)數(shù)（WBC）、尿素氮（BUN）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、D二聚體（D-D）、動(dòng)脈血乳酸（Lac）、動(dòng)脈血二氧

6、化碳分壓(PaCO2）和急性生理和慢性健康狀態(tài)評(píng)分(Acute Physiology and Chronic Health Evaluation，APACHEⅡ評(píng)分)等相關(guān)實(shí)驗(yàn)室檢查指標(biāo)。通過(guò)RT-PCR檢測(cè)健康對(duì)照組及輕中重中毒3組患者血清中miR-21-5P和miR-155-5P的表達(dá)量，分析對(duì)比兩者在不同組別間的表達(dá)差異，探討miR-21-5P和miR-155-5P表達(dá)對(duì)百草枯中毒診斷及預(yù)后的指導(dǎo)意義。
　　結(jié)果：
　

7、　1.百草枯中毒患者入組時(shí)一般資料對(duì)比分析：輕型、中型、重型3組間性別、年齡、中毒距就診時(shí)間、中毒距洗胃時(shí)間無(wú)明顯差異，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；3組間中毒劑量、WBC、BUN、ALT、PaCO2、Lac、APACHEⅡ評(píng)分差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　2.血清中miR-21-5P和miR-155-5P的表達(dá)對(duì)百草枯中毒的診斷效能分析：血清 miR-21-5P診斷百草枯中毒的ROC曲線下面積是88.3%（95%CI，

8、0.813-0.953)，當(dāng)miR-21-5P表達(dá)量為0.56時(shí)約登指數(shù)為最大值。miR-155-5P診斷百草枯中毒的曲線下面積是83.9%（95%CI，0.759-0.919），當(dāng) miR-155-5P表達(dá)量為0.67時(shí)約登指數(shù)為最大值。
　　3.血清中miR-21-5P和miR-155-5P的表達(dá)量在輕型、中型、重型百草枯中毒組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　4.百草枯中毒患者預(yù)后相關(guān)因素分析：死亡組和存活組之

9、間性別、年齡、中毒距離洗胃的時(shí)間、中毒距離就診的時(shí)間差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。死亡組的中毒劑量、尿百草枯濃度、WBC、BUN、ALT、Lac、APACHEⅡ評(píng)分、miR-21-5P和miR-155-5P明顯高于存活組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），PaCO2明顯低于存活組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.miR-21-5P和miR-155-5P在百草枯中毒患者血清中表達(dá)量高于健康對(duì)

10、照組，提示兩者可能參與調(diào)控百草枯中毒的發(fā)病過(guò)程。
　　2.miR-21-5P和miR-155-5P在不同程度百草枯中毒患者血清中表達(dá)量呈顯著差異，并且死亡組相較于生存組表達(dá)量有顯著升高，并且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。提示兩者可能參與調(diào)控百草枯中毒發(fā)展和惡化的過(guò)程，同時(shí)也可作為區(qū)分百草枯中毒病情嚴(yán)重程度與判斷患者預(yù)后的指標(biāo)。
　　3.miR-21-5P和miR-155-5P作為基因?qū)用娴纳飿?biāo)記物，具有一定的臨床應(yīng)用前