L-K6抗菌肽-脂質(zhì)體載藥系統(tǒng)的制備、表征以及體外抗乳腺癌活性評(píng)價(jià).pdf

1、乳腺癌作為女性常見(jiàn)的惡性腫瘤，嚴(yán)重威脅人類(lèi)健康。乳腺癌對(duì)傳統(tǒng)化療藥物的治療易產(chǎn)生耐藥性，從而造成乳腺癌臨床療效欠佳甚至治療失敗。近年來(lái)，隨著對(duì)陽(yáng)離子抗菌肽研究的不斷深入，人們發(fā)現(xiàn)其具有良好的靶向性抑癌效果，且不易產(chǎn)生耐藥性，有望成為新的抗癌藥物。但是這類(lèi)抗菌肽存在在體內(nèi)易水解，穩(wěn)定性較差等不足，影響了其作為藥物在臨床應(yīng)用。為了解決這一問(wèn)題，我們嘗試制備陽(yáng)離子抗菌肽-脂質(zhì)體載藥系統(tǒng)，并對(duì)其理化性質(zhì)、穩(wěn)定性及體外靶向性抗癌活性進(jìn)行考察。

2、r>　　本文首先制備具有不同磷脂成分比例的脂質(zhì)體，通過(guò)比較藥物包封率，確定L-K6脂質(zhì)體的最佳制備方案為S100大豆磷脂∶膽固醇=2∶1;同時(shí)我們還對(duì)制備的L-K6脂質(zhì)體及PEG修飾L-K6脂質(zhì)體進(jìn)行表征。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，普通L-K6脂質(zhì)體包封率為（63.29±2.13）％，粒徑為（116.4±1.40）nm，Zeta電位為（0.133±0.21）mv;而PEG修飾L-K6脂質(zhì)體盡管其包封率與L-K6脂質(zhì)體接近1(60.79±1.56)％

3、]，但粒徑減小為（108.9±1.37）nm，Zeta電位變?yōu)椋?5.04±0.19）mv，因此PEG修飾L-K6脂質(zhì)體比L-K6脂質(zhì)體具有更好的體系穩(wěn)定性。
　　接下來(lái)，我們對(duì)L-K6、L-K6脂質(zhì)體和PEG修飾L-K6脂質(zhì)體的抑癌作用進(jìn)行考察。體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，L-K6、L-K6脂質(zhì)體和PEG修飾L-K6脂質(zhì)體作用人乳腺癌MCF-7細(xì)胞24h，具有相近的抑癌效果，且對(duì)人永生化表皮HaCaT細(xì)胞無(wú)明顯細(xì)胞毒，說(shuō)明脂質(zhì)體載藥系

4、統(tǒng)較好地保留了抗菌肽本身所具有的選擇性抑癌活性。
　　最后，我們通過(guò)體外及體內(nèi)實(shí)驗(yàn)對(duì)載藥脂質(zhì)體的生物穩(wěn)定性進(jìn)行了考察。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，L-K6與小鼠血清體外共孵育2h后，其藥物含量降低至61％（默認(rèn)0h時(shí)間點(diǎn)藥物含量為100％），說(shuō)明易被血清中蛋白結(jié)合或被酶類(lèi)物質(zhì)降解，L-K6脂質(zhì)體與血清體外共孵育24h藥物含量為50％，48h藥物含量為39％，而PEG修飾L-K6脂質(zhì)體與血清體外共孵育2h后藥物含量為94％，48h后藥物含量為66

5、％，96h后才降到34％，相比于L-K6脂質(zhì)體顯示出較好的體外生物穩(wěn)定性。體內(nèi)藥物含量測(cè)定結(jié)果也進(jìn)一步證明PEG修飾L-K6脂質(zhì)體比L-K6具有更好的生物穩(wěn)定性。
　　綜上所述，PEG修飾的L-K6脂質(zhì)體載藥系統(tǒng)與L-K6都能與腫瘤細(xì)胞選擇性的結(jié)合，并且在體外顯示出相近的抑癌效果。同時(shí)，在離體血清環(huán)境和體內(nèi)藥物含量檢測(cè)中，與L-K6相比，PEG修飾L-K6脂質(zhì)體具有更好的生物體內(nèi)穩(wěn)定性，有效地保護(hù)了L-K6，為今后肽類(lèi)抗癌新藥的制