寒水石化灰小劑對(duì)大鼠胃癌前病變及胃癌干預(yù)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：寒水石化灰小劑是蒙藥治療消化系統(tǒng)疾病的藥物中具有代表性的灰化劑，本課題探討寒水石化灰小劑對(duì)大鼠胃癌前病變及胃癌的預(yù)防及治療作用，為其臨床應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：化學(xué)誘變劑甲基硝基亞硝基胍(N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine,MNNG)誘導(dǎo)32周建立大鼠胃癌前病變及胃癌模型；造模21周開始分別給予高、中、低劑量寒水石化灰小劑及陽性藥胃復(fù)春，觀察藥物對(duì)大鼠胃癌前病變及胃癌模型

2、的干預(yù)作用；觀察實(shí)驗(yàn)期間各組大鼠體重、進(jìn)食量、飲水量及一般體征變化；40周實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，對(duì)各組大鼠胃黏膜進(jìn)行大體觀察，計(jì)算腫瘤發(fā)生率；放免法檢測(cè)血清中胃泌素（GAS）和腫瘤壞死因子-α（TNF-α）水平；采集胃部病變及病變旁組織做HE染色，進(jìn)行病理觀察；免疫組化技術(shù)檢測(cè)胃部病變及病變旁組織Bcl-2/Bax表達(dá)；Western Blotting檢測(cè)胃部病變及病變旁組織Bcl-2/Bax表達(dá)。
　　結(jié)果：（1）大鼠一般狀況體征變化：模

3、型組體態(tài)消瘦，被毛松散、變黃，精神萎靡，糞便稀溏甚至泄瀉，尾色蒼白，給藥后以上癥狀均有不同程度改善，尤其高劑量組癥狀恢復(fù)明顯；造模期間，從第4周開始，模型組體重顯著低于正常組，給藥干預(yù)后，大鼠體重有所增長(zhǎng)，但體重仍低于正常組。（2）大鼠進(jìn)食量、飲水量結(jié)果：模型組與正常組相比，進(jìn)食量、飲水量均減少；給予藥物干預(yù)后，給藥組進(jìn)食量、飲水量均有不同程度增加。（3）胃部大體觀察結(jié)果顯示：隨著造模時(shí)間延長(zhǎng)，模型組胃部黏膜變薄、顏色變淺，彈性變差，皺

4、襞走向逐漸紊亂，造模第40周時(shí)，胃竇部有明顯腫物，胃黏膜大部分脫落且顏色蒼白，胃壁較薄，彈性變差，胃黏膜皺襞走向紊亂，皺襞變淺，有大量出血點(diǎn)，成散狀或樹枝狀，血管透見；給予寒水石化灰小劑后，以上癥狀有所改善。（4）各組腫瘤發(fā)生率結(jié)果：模型組腫瘤發(fā)生率最高，給予寒水石化灰小劑組腫瘤發(fā)生率明顯下降。（5）寒水石化灰小劑對(duì)GAS、TNF-α表達(dá)的影響結(jié)果：模型組GAS、TNF-α水平顯著升高（P＜0.01），給予寒水石化灰小劑干預(yù)后，與模型組

5、相比，各給藥組GAS、TNF-α水平均有不同程度降低，高劑量組GAS、TNF-α水平顯著降低，說明寒水石化灰小劑能夠下調(diào)GAS、TNF-α表達(dá)水平，高劑量組干預(yù)作用尤為明顯。（6）胃部病變組織及病變旁組織病理變化觀察結(jié)果：隨著造模時(shí)間延長(zhǎng)，模型組胃部細(xì)胞大小、形態(tài)、極性逐漸出現(xiàn)異常，造模第40周時(shí)，癌細(xì)胞深至肌層，表現(xiàn)為腺癌，腺腔擴(kuò)張，核分裂增多，非典型增生，腺體排列紊亂，深染，腺體大小不一，核分裂較多，核固縮，結(jié)構(gòu)紊亂，腫瘤突破黏膜，

6、癌旁組織癥狀輕于癌組織癥狀；給予寒水石化灰小劑后，病理切片中細(xì)胞排列、形態(tài)、極性等有所改善。（7）免疫組化技術(shù)檢測(cè)Bcl-2/Bax蛋白表達(dá)結(jié)果：隨著造模時(shí)間延長(zhǎng)，Bcl-2陽性表達(dá)逐漸增加，Bax陽性表達(dá)逐漸降低，Bcl-2/Bax比值逐漸增加，同一時(shí)期內(nèi)病變組織的Bcl-2/Bax比值高于病變旁組織的比值；給予寒水石化灰小劑后，Bcl-2陽性表達(dá)逐漸降低，Bax陽性表達(dá)逐漸增加，Bcl-2/Bax比值逐漸降低，其中高劑量的干預(yù)作用最

7、強(qiáng)。（8）Western Blotting技術(shù)檢測(cè)Bcl-2/Bax蛋白表達(dá)結(jié)果：隨著造模時(shí)間延長(zhǎng)，模型組Bcl-2/Bax比值均有不同程度升高，同一時(shí)期內(nèi)病變組織的Bcl-2/Bax比值高于病變旁組織的比值；給予寒水石化灰小劑后，Bcl-2/Bax比值降低，說明寒水石化灰小劑能夠下調(diào)Bcl-2，上調(diào)Bax的表達(dá)，其中高劑量的干預(yù)作用最強(qiáng)。
　　結(jié)論：（1）MNNG能夠成功建立大鼠胃癌前病變及胃癌模型。（2）寒水石化灰小劑能夠增加