ABCA1表達(dá)水平在SLE患者動(dòng)脈粥樣硬化形成中的作用.pdf

1、系統(tǒng)性紅斑狼瘡（Systemic lupus erythematosus，SLE）是一種有多系統(tǒng)損害的慢性系統(tǒng)性自身免疫性炎癥性結(jié)締組織病，三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)子(ATP-binding cassette transporter A1，ABCA1)是以ATP為能量來源，通過與ApoA1結(jié)合而促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)膽固醇流出、磷脂的轉(zhuǎn)運(yùn)以及抑制血管壁的炎癥反應(yīng)及高密度脂蛋白生成的膜蛋白。相關(guān)實(shí)驗(yàn)證實(shí)把小鼠ABCA1基因敲除可以表現(xiàn)出高密度脂蛋白(HD

2、L)降低、胰腺β細(xì)胞功能紊亂、和動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成，人類ABCA1基因突變同樣會(huì)導(dǎo)致血漿HDL降低，成為誘發(fā)心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)。ABCA1蛋白的表達(dá)在膽固醇的轉(zhuǎn)運(yùn)中起著重要作用，本文通過建立一種抗ABCA1自身抗體檢測(cè)的免疫測(cè)定法，研究ABCA1自身抗體在體外對(duì)胞內(nèi)膽固醇流出的影響，在課題組ABCA1蛋白表達(dá)上調(diào)劑篩選模型基礎(chǔ)上，選取吳茱萸次堿研究系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者ABCA1表達(dá)水平與動(dòng)脈粥樣硬化形成的相關(guān)性，從而探討ABCA1蛋白表

3、達(dá)在狼瘡早發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化中的影響，以指導(dǎo)臨床對(duì)SLE患者動(dòng)脈粥樣硬化的早期預(yù)防。
　　目的:
　　分析ABCA1蛋白表達(dá)水平在系統(tǒng)性紅斑狼瘡癥(SLE)患者動(dòng)脈粥樣硬化形成中的影響，闡述抗ABCA1抗體誘發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化的機(jī)制，并通過檢測(cè)吳茱萸次堿是否能夠提高自身免疫性ABCA1抗體陽性SLE患者ABCA1蛋白表達(dá)，為臨床SLE患者早發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化的預(yù)防和治療提供理論依據(jù)。
　　方法:
　　1.選取鄭州大學(xué)第一附屬

4、醫(yī)院風(fēng)濕免疫科2014年-2015收治的SLE患者與健康受試者進(jìn)行血脂水平比較，檢測(cè)了各組血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、TC、TG、LDL及HDL的水平，患者病例數(shù)選取80例;
　　2.采用人單核細(xì)胞株THP-1細(xì)胞體外培養(yǎng)、PMA刺激使其細(xì)胞膜高表達(dá)ABCA1蛋白，提取ABCA1蛋白進(jìn)行定量和鑒定;用免疫印跡法檢測(cè)患者和對(duì)照組血清中抗ABCA1抗體陽性情況;
　　3.通過蛋白A凝膠層析柱純化人IgG抗體，并以IgG抗體體外

5、干預(yù)THP-1細(xì)胞，檢測(cè)抗ABCA1抗體陽性患者IgG體外對(duì)膽固醇流出的影響。
　　4.用實(shí)時(shí)定量PCR及Weseren印跡方法對(duì)ABCA1mRNA轉(zhuǎn)錄水平及蛋白質(zhì)表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)，選取吳茱萸次堿以研究SLE患者ABCA1抗體陽性組ABCA1自身抗體在體外對(duì)胞內(nèi)膽固醇流出的影響以及在SLE患者中ABCA1轉(zhuǎn)錄水平及蛋白表達(dá)水平與動(dòng)脈粥樣硬化形成的相關(guān)性。
　　結(jié)果:
　　1.血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、TC、TG及LDL

6、的水平檢測(cè)發(fā)現(xiàn)SLE組中各項(xiàng)檢測(cè)水平除HDL外均高于正常對(duì)照組。尤其是HDL水平的顯著降低提示SLE患者存在脂代謝紊亂的的特點(diǎn)。而HDL作為抗動(dòng)脈粥樣硬化的血漿脂蛋白，在 SLE患者體內(nèi)的顯著降低可能與SLE患者本身體內(nèi)存在的抗ABCA1抗體存在相關(guān)性。
　　2.SLE患者ABCA1抗體陽性率明顯高于體檢健康者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。SLE伴動(dòng)脈粥樣硬化組ABCA1抗體陽性率高于SLE不伴動(dòng)脈粥樣硬化組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意

7、義(P＜0.05)。
　　3.與體檢健康IgG干預(yù)組對(duì)比，抗ABCA1抗體陽性IgG干預(yù)組膽固醇流出率明顯降低，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　4.用實(shí)時(shí)定量PCR及Weseren印跡方法對(duì)ABCA1 mRNA及蛋白質(zhì)表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示，與抗ABCA1抗體對(duì)照組相比，吳茱萸次堿(5.0μg·mL-1)處理組ABCA1mRNA上調(diào)0.49±0.05(P＜0.05)。吳茱萸次堿(5.0μg·mL-1)處理組與抗AB

8、CA1抗體對(duì)照組相比ABCA1上調(diào)0.52±0.01(P＜0.05)。ABCA1蛋白表達(dá)水平與SLE患者體內(nèi)自身ABCA1抗體存在顯著相關(guān)性，而吳茱萸次堿能夠顯著上調(diào)SLE患者體內(nèi)ACBA1蛋白的表達(dá)，從而促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)膽固醇外流。
　　結(jié)論:
　　1.抗ABCA1抗體能夠抑制SLE患者胞內(nèi)膽固醇的流出，可能由此促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展。
　　2.ABCA1表達(dá)水平對(duì)系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生起到關(guān)鍵作用，提高