巨噬細胞源性CCL2通過TLR4-CCR2途徑招募中性粒細胞促進肝缺血再灌注損傷.pdf

1、研究背景：
　　肝臟缺血再灌注損傷，臨床上多見于失血性休克、肝移植、肝切除術后、感染性休克等情況下，是嚴重影響患者生命及疾病預后的一類以肝臟免疫失調及全身性炎癥反應為主要特征的多因素病理過程。
　　在肝臟缺血再灌注損傷過程中，中性粒細胞作為一類快速反應性免疫細胞，可以在多種趨化因子的作用下從骨髓動員并浸潤到受損的肝臟組織中，進而造成肝損傷。參與中性粒細胞動員及浸潤的趨化因子種類繁多，其中以CXCL1和CXCL2在骨髓動員過程

2、中發(fā)揮的作用最為主要。炎性單核細胞作為細胞因子庫，其動員和浸潤稍晚于中性粒細胞，在肝臟缺血再灌注過程中可以釋放多種趨化因子和細胞因子，從而擴大炎癥反應。炎性單核細胞的動員和浸潤主要依賴于CCL2-CCR2信號通路。然而，在肝缺血再灌注過程中，這兩種細胞的動員和浸潤的具體機制及其與體內免疫細胞間的相互作用目前仍不完全清楚。
　　研究目的：
　　1.探討肝臟缺血再灌注過程中中性粒細胞動員的機制。
　　2.闡明免疫細胞之間和

3、重要免疫細胞受體分子之間相互關系。
　　研究方法：
　　對野生型、CCL2-/-、CCR2-/-和TLR4-/-小鼠進行肝臟缺血1小時再灌注6小時模型的建立。從組織學、肝功能和炎性因子表達三個方面來評價肝臟損傷情況。流式細胞術檢測骨髓和肝臟中性粒細胞比例及其表面CCR2的表達情況。細胞內因子染色檢測肝臟組織內CCL2的細胞來源。尾靜脈注射重組鼠類CCL2檢測其對中性粒細胞趨化作用。利于氯磷酸二鈉脂質體刪除體內巨噬細胞來驗證細

4、胞間相互作用關系。
　　研究結果：
　　與野生型小鼠相比，CCL2-/-、CCR2-/-和TLR4-/-小鼠肝損傷減輕，中性粒細胞骨髓動員和肝臟浸潤減少。中性粒細胞動員及浸潤依賴于其表面CCR2的表達。刪除肝臟枯否細胞后，肝損傷減輕，CCL2表達減少，中性粒細胞浸潤減少。炎性單核細胞的動員及浸潤完全依賴于CCL2-CCR2信號通路。中性粒細胞通過TLR4的激活進而活化其表面受體CCR2從而介導中性粒細胞招募。
　　研究