PKCβ抑制劑通過影響巨噬細(xì)胞亞型的改變對腎缺血再灌注損傷起保護(hù)作用.pdf

1、目的：
　　采用腎缺血再灌注損傷為模型，經(jīng)口給予蛋白激酶Cβ（PKCβ）抑制劑干預(yù)，觀察PKCβ抑制劑對腎缺血再灌注損傷中炎性介質(zhì)及巨噬細(xì)胞等的影響，探討其對腎IRI的保護(hù)機(jī)制。
　　方法：
　　將購買的大鼠隨機(jī)分為三組，分別為腎缺血再灌注損傷模型組（A組），PKCβ抑制劑干預(yù)組（B組）和假手術(shù)組（C組）。A組予去右腎，左腎按常規(guī)方式即腎蒂鉗夾缺血60分鐘后恢復(fù)灌注24小時；B組予術(shù)前經(jīng)口腔給藥PKCβ抑制劑干預(yù)；C組

2、僅行開腹、60分鐘后關(guān)腹手術(shù)。術(shù)后24小時取下腔靜脈血及腎臟標(biāo)本進(jìn)行實驗研究：
　　1.全自動生化儀檢測各組血清肌酐值及尿素情況；
　　2.PAS染色觀察病理組織損傷嚴(yán)重程度；3.免疫組織化學(xué)法檢測腎損傷分子-1、腎乳頭狀抗原-1及誘生型一氧化氮合酶-1、精氨酸酶-1的表達(dá)；
　　結(jié)果：
　　1.全自動生化儀檢測血清肌酐、尿素結(jié)果示：尿素值A(chǔ)、B組均較C組增高（P<0.01），且A組水平高于B組（P<0.01）；

3、同樣肌酐值A(chǔ)、B組也均高于C組（P<0.01），但A組與B組比較無明顯差異（P＞0.05）；
　　2.腎組織PAS染色結(jié)果：A組腎間質(zhì)水腫、炎性細(xì)胞浸潤，腎小管嚴(yán)重破壞、結(jié)構(gòu)紊亂、管腔擴(kuò)張，可見小管刷狀緣丟失、管狀上皮細(xì)胞扁平、脫落，并有大量管型存在；B組：相較A組，小管結(jié)構(gòu)較清晰，腎間質(zhì)水腫及炎性細(xì)胞浸潤減輕，但仍可見部分小管結(jié)構(gòu)破壞，偶見管型；C組：小管結(jié)構(gòu)清晰、完整，未見管型及明顯間質(zhì)水腫，但組織間隙中可見少量炎性細(xì)胞浸潤。

4、
　　3.免疫組化檢測：KIM-1結(jié)果顯示在C組少量表達(dá)，A組、B組表達(dá)均較C組明顯升高（P<0.01），而A組又顯著強(qiáng)于B組（P<0.01）；RPA-1示A組在腎乳頭小管強(qiáng)陽性表達(dá)，B組表達(dá)較A組明顯減輕（P<0.01），C組微量或基本未見表達(dá)。同樣iNOS的表達(dá)也顯示A組明顯強(qiáng)于B、C組（P<0.01），C組表達(dá)甚少，B組強(qiáng)于C組（P<0.01）；而在Arg-1的表達(dá)上B組較A、C組均強(qiáng)（P<0.01），而A組又高于C組（P<