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1、目的: 探討caspase-3抑制劑(Ac-DEVD-CHO)對(duì)腎缺血再灌注損傷的保護(hù)作用,并對(duì)其可能機(jī)制進(jìn)行初步研究。 方法: 采用切除右腎,夾閉左側(cè)腎蒂致左腎缺血,原位再灌注制作(小鼠)腎缺血再灌注損傷模型。雄性昆明種小鼠30只,隨機(jī)分為假手術(shù)組、缺血再灌注組、(Ac-DEVD-CHO)治療組。治療組在腎臟缺血45分鐘后再灌注時(shí)經(jīng)尾靜脈給予Ac-DEVD-CHO(4 μg/g)(溶于0.3ml含1%DMSO的生理鹽水),缺血
2、再灌注組再灌注時(shí)給予0.3ml含1%DMSO的生理鹽水,假手術(shù)組不夾閉腎蒂,余處理同缺血再灌注組。各組小鼠于再灌注12小時(shí)后摘眼球取血檢測(cè)血肌酐及尿素氮水平;切取左腎標(biāo)本,用比色法檢測(cè)腎組織勻漿MPO及caspase-3活性,TUNEL法檢測(cè)細(xì)胞凋亡,免疫組化測(cè)定腎組織黏附分子-1(ICAM-1)蛋白表達(dá),腎組織HE染色觀察腎臟損傷情況。 結(jié)果: 假手術(shù)組腎臟結(jié)構(gòu)基本正常,缺血再灌注組可見(jiàn)明顯腎小管上皮細(xì)胞變性、壞死、小管管腔擴(kuò)
3、張,且白細(xì)胞浸潤(rùn)明顯,而治療組較缺血再灌注組上述病理變化明顯減輕。缺血再灌注組與假手術(shù)組比較,血肌酐及尿素氮水平顯著升高(P均<0.01),腎小管上皮細(xì)胞凋亡指數(shù)顯著增高(P<0.01),caspase-3及MPO活性顯著升高(P均<0.01),ICAM-1蛋白表達(dá)明顯增強(qiáng)(P<0.01);治療組與缺血再灌注組比較,血肌酐及尿素氮值明顯下降(P均<0.01),細(xì)胞凋亡指數(shù)顯著降低(P<0.01),caspase-3及MPO活性得到抑制(
4、P<0.01,P<0,05),ICAM-1蛋白表達(dá)減弱(P<0.05):但治療組周假手術(shù)組比較,除caspase-3活性差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義外(P>0.05),其他指標(biāo)兩組間差異仍有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。 結(jié)論: 1.小鼠腎缺血再灌注損傷模型的制作是成功的。缺血再灌注早期就出現(xiàn)明顯的腎臟功能和腎臟組織結(jié)構(gòu)的改變。 2.再灌注開(kāi)始時(shí)給予Ac-DEVD-CHO能顯著減輕小鼠腎缺血再灌注損傷,其保護(hù)機(jī)制可能是通過(guò)抑制casp
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