FGFR1調(diào)控肺鱗癌干性表型的機制研究.pdf

1、研究背景與目的：
　　肺鱗癌是非小細胞肺癌的一個主要亞型，其在肺癌中的占比約為30%。但是與肺腺癌相比，肺鱗癌驅(qū)動基因及相應(yīng)靶向治療的研究仍然進展有限,其主要治療手段仍然局限于傳統(tǒng)的化療、放療和手術(shù)治療。FGFR1擴增是肺鱗癌中的一個重要的基因改變。但是FGFR1在肺鱗癌發(fā)生發(fā)展中的生物學(xué)功能尚不完全清楚。本文將從FGFR1與肺鱗癌細胞干性表型的相關(guān)性入手，研究FGFR1調(diào)控肺鱗癌細胞干性表型的分子機制；并以此為基礎(chǔ)，進一步探討在

2、以FGFR1抑制劑治療肺鱗癌的過程中，發(fā)生原發(fā)性耐藥的可能機制。
　　研究方法及結(jié)果:
　　第一部分我們首先通過無血清培養(yǎng)法，從FGFR1擴增的肺癌細胞株中分離得到了具有干細胞樣表型的腫瘤球，并通過RT-PCR，流式細胞術(shù)，裸鼠皮下移植瘤等一系列實驗，研究了腫瘤球與母代細胞之間在腫瘤細胞干性表型方面的差異，并證明腫瘤球相對于母代細胞有更強的干性表型；其次，我們重點研究了FGFR1在維持FGFR1擴增細胞的干性表型方面所起的作

3、用。我們構(gòu)建了干擾FGFR1的穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞系，并結(jié)合使用FGFR1抑制劑和激活劑處理細胞，發(fā)現(xiàn)抑制FGFR1能削弱腫瘤球的自我更新與增殖能力，減少ALDH+細胞亞群的比例，降低干性分子標志的表達的相關(guān)性。最后，我們在體內(nèi)試驗中，發(fā)現(xiàn) FGFR1抑制劑能抑制腫瘤球與母代H1581來源的移植瘤的增殖。
　　第二部分我們進一步研究了GLI2在維持FGFR1擴增細胞干性表型方面所起的作用。我們構(gòu)建了GLI2干擾的細胞系，發(fā)現(xiàn)干擾GLI2能抑制

4、腫瘤球的自我更新與增殖，減少ALDH+細胞亞群的比例，降低干性分子標志的表達。進一步研究發(fā)現(xiàn)FGFR1可能通過ERK信號通路調(diào)控GLI2的分子機制。干擾FGFR1對肺鱗癌干細胞表型的抑制效應(yīng)可被過表達GLI2所“拯救”。最后，通過對臨床標本及相關(guān)數(shù)據(jù)庫的研究，我們發(fā)現(xiàn)在肺鱗癌中FGFR1與GLI2在表達層面存在顯著地正相關(guān)。并且FGFR1與GLI2的高表達與PFS呈負相關(guān)性。
　　第三部分我們發(fā)現(xiàn)在肺鱗癌組織中，F(xiàn)GFR1、SOX

5、2、GLI2三者在基因拷貝數(shù)層面與轉(zhuǎn)錄譜層面存在相關(guān)性。在H520細胞中研究了干擾FGFR1能抑制SOX2的表達，以及干擾 SOX2卻能抑制 GLI2表達的影響。最后我們研究發(fā)現(xiàn) SOX2高表達與FGFR1抑制劑耐藥之間存可能存在相關(guān)性。
　　研究結(jié)論：
　　我們研究發(fā)現(xiàn)FGFR1能通過ERK信號通路調(diào)節(jié)GLI2的表達，進而調(diào)控FGFR1擴增細胞的干性表型及其自我更新的能力。在肺鱗癌組織中，F(xiàn)GFR1與GLI2的表達呈正相關(guān)