RNA-Peptide雙重適配體介導(dǎo)腺病毒-阿霉素腫瘤靶向遞藥系統(tǒng)的構(gòu)建及其對(duì)前列腺癌的抑制作用研究.pdf

1、目的：肽適配體 DUP-1能靶向于 PSMA陰性的前列腺癌細(xì)胞， RNA適配體 A10-3.2能靶向于 PSMA陽(yáng)性的前列腺癌細(xì)胞，攜載抑癌基因PTEN的重組腺病毒Ad5和鹽酸阿霉素DOX都能有效抑制前列腺癌，本研究擬探索經(jīng)過雙重適配體修飾并攜載有 DOX的含有 PTEN的重組腺病毒給藥系統(tǒng) A10-3.2(DOX)/DUP-1-PEG-Ad5（ADDP-Ad5）的構(gòu)建，并對(duì)給藥系統(tǒng)的體外毒性、細(xì)胞攝取以及體內(nèi)急性毒性進(jìn)行研究。方法：本

2、研究擬用功能性 PEG為連接臂，利用酰胺反應(yīng)原理，將適配體 DUP-1和 A10-3.2同時(shí)連接到攜載抑癌基因 PTEN的腺病毒表面，再利用 DOX能與 RNA雙鏈 CG序列牢固結(jié)合的特點(diǎn)，將基因治療和化學(xué)治療巧妙地整合為一體；然后用人正常前列腺上皮細(xì)胞WPMY-1、人肝癌細(xì)胞 HepG2、前列腺癌細(xì)胞 LNCaP（ PSMA+）和PC3（PSMA-）檢測(cè)給藥系統(tǒng) ADDP-Ad5的細(xì)胞抑制作用和攝取情況；最后進(jìn)行急性毒性實(shí)驗(yàn)，檢測(cè) A

3、DDP-Ad5的體內(nèi)毒性。結(jié)果：實(shí)驗(yàn)得出腺病毒Ad5的PEG化效率為98.7±2.43％，Ad5-PEG與適配體DUP-1和 A10-3.2反應(yīng)產(chǎn)率分別為80.4±1.36%和82.2±2.14%，DOX嵌入雙鏈適配體 A10-3.2中的最佳比例為1:2；給藥系統(tǒng) ADDP-Ad5對(duì)細(xì)胞的抑制作用從大到小依次為 LNCaP，PC3，HepG2，WPMY-1，LNCaP對(duì)ADDP-Ad5的攝取量要明顯多于 PC3的攝取量；體外急性毒性實(shí)驗(yàn)