激光微孔脫細(xì)胞豬真皮支架對(duì)Ⅲ度皮膚燒傷血管化的影響.pdf

1、目的：探討激光微孔聯(lián)合反復(fù)凍融脫細(xì)胞方法制備的激光微孔脫細(xì)胞豬真皮支架對(duì)大鼠Ⅲ度皮膚燒傷創(chuàng)面愈合作用及血管化的影響，為臨床提供理想的真皮支架材料。
　　方法：
　　第一步采用激光打微孔+低濃度胰蛋白酶+反復(fù)凍融+恒溫振蕩制備的異種脫細(xì)胞豬真皮基質(zhì)，HE染色檢測(cè)；
　　第二步將制備的激光微孔異種脫細(xì)胞豬真皮和普通打孔異種脫細(xì)胞豬真皮進(jìn)行皮下埋植實(shí)驗(yàn)。具體方法：24只300g左右成年雄性無病原體級(jí)SD大鼠，將兩種真皮基質(zhì)分

2、別埋植于SD大鼠背部左右兩側(cè)皮下，術(shù)后3天、1周、2周和3周掀開皮瓣進(jìn)行真皮基質(zhì)HE染色和CD31免疫組化染色標(biāo)記。
　　第三步復(fù)合皮移植實(shí)驗(yàn)。具體方法：72只300g左右成年雄性無病原體級(jí)SD大鼠，依據(jù)真皮移植物的不同，分為激光微孔脫細(xì)胞豬真皮(A組)、普通打孔脫細(xì)胞豬真皮（B組）兩種真皮支架分別移植至Ⅲ度燒傷清創(chuàng)后創(chuàng)面，另一組創(chuàng)面清創(chuàng)后僅覆蓋油紗（C組），術(shù)后1周在異種豬真皮( A和B組)或者肉芽上（C組）植入表皮，大體觀察植

3、入真皮支架1、2、3周創(chuàng)面的修復(fù)情況，并通過HE染色和免疫組化標(biāo)記創(chuàng)面中CD31、α-SMA表達(dá)陽性血管并計(jì)數(shù)。
　　結(jié)果：制備的脫細(xì)胞豬真皮呈瓷白色，有光澤，柔軟；顯微鏡下未見細(xì)胞殘留，真皮膠原結(jié)構(gòu)完整。皮下埋植實(shí)驗(yàn)3周結(jié)果顯示：真皮基質(zhì)與大鼠受皮組織相容性好，無排斥反應(yīng)；CD31標(biāo)記的陽性血管數(shù)：術(shù)后3天兩組無明顯差異，埋植術(shù)后1周、2周和3周，微孔組表達(dá)陽性血管數(shù)均明顯多于普通孔組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。復(fù)合皮移植實(shí)驗(yàn)結(jié)果：兩

4、組脫細(xì)胞真皮支架及無支架對(duì)照組植入后1～3周創(chuàng)面中CD31、α-SMA表達(dá)陽性血管數(shù)均持續(xù)增加，其中A組顯著高于B、C組，B組顯著高于C組；真皮支架植入一周后在真皮上植入表皮，表皮移植后一周A組表皮融合成片，B組表皮散在存活皮片生長(zhǎng)情況好；術(shù)后3周A組表皮皮片融合成片，支架已與創(chuàng)面完全結(jié)合；B組表皮開始融合，皮片生長(zhǎng)良好，支架與基底結(jié)合緊密。
　　結(jié)論：
　　1.本實(shí)驗(yàn)研究的脫細(xì)胞方法脫細(xì)胞徹底，基本上達(dá)到了祛除所有含抗原成