汗腺樣細(xì)胞復(fù)合羊皮脫細(xì)胞真皮基質(zhì)對(duì)創(chuàng)面愈合影響的研究.pdf

1、皮膚是機(jī)體最大的器官，作為機(jī)體最表層，皮膚像一道屏障覆于機(jī)體的表面，起到保持皮膚水分，維持正常生理功能的作用。當(dāng)皮膚受到外界損傷或者疾病等因素的影響而造成缺損時(shí)，會(huì)對(duì)生命體造成嚴(yán)重的危害，甚至危及生命。研究發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞治療有助于皮膚損傷的修復(fù)。本研究主要探討由大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(Rat Bone marrow mesenchymal stem cells，rBM-MSCs)誘導(dǎo)盼汗腺樣細(xì)胞(sweat gland-like cells)

2、與羊脫細(xì)胞真皮基質(zhì)(acellular dermal matrix，ADM)復(fù)合后對(duì)創(chuàng)面愈合的影響。
　　本研究以大鼠骨髓為材料來(lái)源，采用全骨髓貼壁法培養(yǎng)獲得目的細(xì)胞。通過(guò)形態(tài)、增殖能力和表面標(biāo)志的鑒定顯示出所得細(xì)胞為rBM-MSCs。其次，通過(guò)將rBM-MSCs與大鼠熱休克汗腺細(xì)胞(sweat glands cells，SGCs)共培養(yǎng)的方法進(jìn)行細(xì)胞誘導(dǎo)。RT-PCR和細(xì)胞免疫熒光檢測(cè)顯示:誘導(dǎo)所得細(xì)胞為汗腺樣細(xì)胞。隨后，采用酶

3、消化法制備出羊ADM，通過(guò)MTS法檢測(cè)細(xì)胞毒性和HE染色檢測(cè)其脫細(xì)胞程度顯示:ADM脫細(xì)胞程度較為徹底，且沒(méi)有細(xì)胞毒性。最后，分別將復(fù)合有汗腺樣細(xì)胞的ADM和未復(fù)合汗腺樣細(xì)胞的ADM覆蓋于裸鼠損傷創(chuàng)面上。通過(guò)對(duì)創(chuàng)面愈合率、參與創(chuàng)面愈合的蛋白VEGF和Collagen-Ⅰ的表達(dá)情況、愈合創(chuàng)面細(xì)胞凋亡相關(guān)基因Bax/Bcl-2的相對(duì)表達(dá)量的變化的測(cè)定顯示:汗腺樣細(xì)胞復(fù)合羊ADM抑制了愈合創(chuàng)面組織的細(xì)胞凋亡并且加快了創(chuàng)面的愈合速率。綜上所述，