丹參酮ⅡA基于TLR4—MyD88—NF-κB通路和microRNA-155途徑的抗炎作用研究.pdf

1、背景：炎癥（inflammation)是具有血管系統(tǒng)的活性組織對(duì)損傷因子所發(fā)生的防御反應(yīng)，而持續(xù)的炎癥反應(yīng)會(huì)對(duì)機(jī)體造成損傷。已知許多疾病的發(fā)生發(fā)展過(guò)程均有炎癥的參與，抑制或減輕機(jī)體炎癥反應(yīng)有利于多種疾病的治療與轉(zhuǎn)歸。
　　丹參酮IIA(tanshinone IIA)是活血化瘀中藥丹參&/w+amiltiorrhiza Bge.中提取的丹參酮型二萜類單體，屬于黃酮類化合物。實(shí)驗(yàn)及臨床證實(shí)，丹參酮IIA具有良好的抗炎作用，并且具有毒副

2、作用小、資源豐富的優(yōu)點(diǎn)。因此近年來(lái)，關(guān)于丹參酮IIA抗炎作用的藥理研究成為研究熱點(diǎn)。體內(nèi)單核-巨噬細(xì)胞系統(tǒng)主要包括血液中的單核細(xì)胞(monocyte)和組織器官中的巨噬細(xì)胞(macrophage)—一具有強(qiáng)大的吞噬、殺菌和清除凋亡細(xì)胞的能力。
　　目的：本研究以LPS誘導(dǎo)的單核巨噬細(xì)胞系RAW264.7為炎癥模型，探討丹參酮IIA的抗炎作用以及與microRNA-155和TLR4-MyD88-NF-KB通路的關(guān)系，以期為丹參酮II

3、A的臨床合理應(yīng)用提供藥理學(xué)依據(jù)。
　　方法：采用 LPS誘導(dǎo) RAW264.7細(xì)胞作為炎癥模型，應(yīng)用 siRNA的方法抑制MyD88和 TRIF基因的表達(dá)，考察丹參酮IIA的抗炎作用對(duì)MyD88和 TRIF通路的依賴性；初步探索了丹參酮I I A的抗炎作用與microRNA-155之間的關(guān)系。并采用Q-PCR法檢測(cè) TLR-4、MyD88、TRIF、NF-кB、TNF-α和 IL-1β的 mRNA表達(dá)的影響；用Western bl

4、ot方法探討丹參酮IIA對(duì)TLR-4、MyD88、TRIF和NF-κB蛋白表達(dá)的影響; ELISA方法檢測(cè)TNF-α和IL-1β的水平。
　　結(jié)果：
　　1在LPS誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞中，丹參酮IIA(10μm)能夠抑制炎癥因子TNF-α和IL-1β的表達(dá)，其抗炎作用是MyD88通路而非TRIF通路依賴性的。
　　2在LPS誘導(dǎo)的 RAW264.7細(xì)胞中，丹參酮IIA(10μm)可下調(diào)LPS誘導(dǎo)的microRNA