HMGB1-TLR4和NF-κB信號通路在子癇前期中的研究.pdf

1、目的:
　　1.探討高遷移率族蛋白(HMGB1)/TOLL受體4(TLR4)和NF-kB信號通路在子癇前期中的可能作用;
　　2.研究子癇前期患者血清和胎盤中HMGB1、TLR4及NF-kBp65的表達及其相關(guān)性,從而探討其與子癇前期的關(guān)系。
　　方法:選擇輕度子癇前期患者10例、重度子癇前期患者20例和同期正常妊娠組30例作為研究對象。
　　1.二步法免疫組織化學(SP法)檢測胎盤HMGB1、TLR4、NF-k

2、Bp65蛋白的表達變化及在組織中的定性、定位;
　　2.逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測胎盤組織中HMGB1mRNA、TLR4mRNA、NF-kBp65mRNA的表達變化;
　　3.采用ELISA方法檢測血清中HMGB1、TLR4、NF-kBp65蛋白濃度。
　　結(jié)果:
　　1.選取的病例在臨床特征比較中,子癇前期組與對照組在年齡比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);重度子癇前期組比對照組孕婦終止妊娠時間早

3、(P0.05);子癇前期組平均動脈壓(MAP)、收縮壓、舒張壓、新生兒體重與對照組比較,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　2.免疫組化結(jié)果顯示:
　　2.1正常妊娠組HMGB1主要表達于胎盤組織滋養(yǎng)細胞、血管內(nèi)皮細胞、少量間質(zhì)細胞的胞核,HMGB1在輕度子癇前期組及重度子癇前期組胎盤組織滋養(yǎng)細胞、血管內(nèi)皮細胞、少量間質(zhì)細胞的胞核及胞漿表達;TL

4、R4、NF-kBp65蛋白均主要表達于胎盤組織滋養(yǎng)細胞、血管內(nèi)皮細胞、少量間質(zhì)細胞的胞漿及胞膜。
　　2.2子癇前期患者組胎盤HMGB1、TLR4、NF-kBp65蛋白表達均較正常對照組明顯增強,差異有顯著性(P<0.0125);重度子癇前期患者胎盤HMGB1、TLR4、NF-kBp65蛋白與輕度子癇前期比較差異無條統(tǒng)計學意義(P>O.0125)。
　　3.RT-PCR結(jié)果顯示:
　　3.1子癇前期患者胎盤組織中HMG

5、B1mRNA、TLR4mRNA、NF-kBp65mRNA表達均明顯強于正常組,差異有顯著性(P<0.05);重度子癇前期患者胎盤HMGB1、TLR4、NF-kBp65mRNA與輕度子癇前期比較差異無統(tǒng)計學意義(P>O.05)。
　　3.2HMGB1mRNA與TLR4mRNA的表達強度呈正相關(guān),相關(guān)系數(shù)(r=0.567,P<0.01);HMGB1mRNA與NF-kBp65mRNA的表達強度呈正相關(guān),相關(guān)系數(shù)(r=0.683,P<0.

6、01);TLR4mRNA與NF-kBp65mRNA的表達強度呈正相關(guān),相關(guān)系數(shù)(r=0.729,P<0.01)。
　　4.ELISA測定結(jié)果顯示:
　　4.1子癇前期患者血清中HMGB1、TLR4、NF-kBp65的含量較正常組明顯升高,差異有顯著性(P<0.01);且重度子癇前期患者血清中HMGB1、TLR4、NF-kBp65蛋白表達高于輕度子癇前期(P　　4.2血清NF-kBp65與TLR4的表達強

7、度呈正相關(guān),相關(guān)系數(shù)(r=0.549,P<0.01);血清HMGB1與TLR4的表達強度呈正相關(guān),相關(guān)系數(shù)(r=0.668,P<0.01);HMGB1與NF-kBp65的表達強度呈正相關(guān),相關(guān)系數(shù)(r=0.655,P<0.01)。
　　結(jié)論:當TLR4識別了作為炎癥因子和內(nèi)源性損傷相關(guān)分子模式配體HMGB1時,其下游信號通路開啟,MyD88聚集,活化NF-kB并轉(zhuǎn)錄入核,釋放大量炎性因子造成胎盤血管損傷,促進子癇前期的發(fā)生、發(fā)展,