云芝糖肽對乳腺癌患者PBMC中TLR4受體作用及其對TLR通路MYD88途徑的調(diào)節(jié)機制.pdf

1、目的:研究云芝糖肽(PSP)對乳腺癌患者外周血單個核細胞(PBMC)的Toll樣受體4(TLR4)的作用，以及PSP對PBMC中TLR信號通路MyD88途徑的免疫調(diào)節(jié)作用。
　　方法:于體外分離乳腺癌患者或健康人的PBMC，并將其分為PSP組和對照組，采用TLR4單克隆抗體對各組進行免疫熒光染色。將乳腺癌患者PBMC分為陰性空白對照組、TLR4抗體組、PSP組和PSP+TLR4抗體組，應(yīng)用實時熒光定量PCR(Q-PCR)檢測各組P

2、BMC IL-12、IL-6和TNF-α表達的水平。采用Q-PCR定量檢測PSP處理后TLR通路MyD88途徑相關(guān)基因的表達情況，同時使用Western blot檢測信號末端蛋白的表達情況。
　　結(jié)果:TLR4受體研究中，健康人PBMC對照組細胞熒光強度較強，而PSP組細胞的熒光強度較弱。乳腺癌患者PBMC，PSP組與對照組相比，細胞熒光強度更弱。與陰性空白對照組比較，TLR4抗體組除IL-6外，均顯著降低，PSP組各基因的表達水

3、平顯著上調(diào)，且差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05);與PSP+TLR4抗體組比較，TLR4抗體組和PSP組各基因都明顯下調(diào)，且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05)。PSP能夠顯著提高TLR信號通路中TLR4、TLR5、TLR6、IRAK4、TRAF6、IRF5、TAK1、IKKα、NF-κ B、ERK、P38、JNK、AP-1基因的相對表達量(P＜0.01)，信號末端蛋白NF-κ B、AP-1和IRF5均有上調(diào)。
　　結(jié)論:TLR4可