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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:研究云芝糖肽(PSP)對(duì)乳腺癌患者外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)的Toll樣受體4(TLR4)的作用,以及PSP對(duì)PBMC中TLR信號(hào)通路MyD88途徑的免疫調(diào)節(jié)作用。
方法:于體外分離乳腺癌患者或健康人的PBMC,并將其分為PSP組和對(duì)照組,采用TLR4單克隆抗體對(duì)各組進(jìn)行免疫熒光染色。將乳腺癌患者PBMC分為陰性空白對(duì)照組、TLR4抗體組、PSP組和PSP+TLR4抗體組,應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Q-PCR)檢測(cè)各組P
2、BMC IL-12、IL-6和TNF-α表達(dá)的水平。采用Q-PCR定量檢測(cè)PSP處理后TLR通路MyD88途徑相關(guān)基因的表達(dá)情況,同時(shí)使用Western blot檢測(cè)信號(hào)末端蛋白的表達(dá)情況。
結(jié)果:TLR4受體研究中,健康人PBMC對(duì)照組細(xì)胞熒光強(qiáng)度較強(qiáng),而PSP組細(xì)胞的熒光強(qiáng)度較弱。乳腺癌患者PBMC,PSP組與對(duì)照組相比,細(xì)胞熒光強(qiáng)度更弱。與陰性空白對(duì)照組比較,TLR4抗體組除IL-6外,均顯著降低,PSP組各基因的表達(dá)水
3、平顯著上調(diào),且差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05);與PSP+TLR4抗體組比較,TLR4抗體組和PSP組各基因都明顯下調(diào),且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。PSP能夠顯著提高TLR信號(hào)通路中TLR4、TLR5、TLR6、IRAK4、TRAF6、IRF5、TAK1、IKKα、NF-κ B、ERK、P38、JNK、AP-1基因的相對(duì)表達(dá)量(P<0.01),信號(hào)末端蛋白NF-κ B、AP-1和IRF5均有上調(diào)。
結(jié)論:TLR4可
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