山藥多糖脂質(zhì)體的制備及抗肝損傷作用研究.pdf

1、目的:通過(guò)最佳制備方法，采用最優(yōu)處方制備山藥多糖脂質(zhì)體。考察其形態(tài)、粒度分布、Zeta電位、穩(wěn)定性等理化性質(zhì)，并制備山藥多糖凍干粉，評(píng)價(jià)凍干粉穩(wěn)定性。通過(guò)體內(nèi)外方法初步評(píng)價(jià)其緩釋作用，并探討山藥多糖脂質(zhì)體對(duì)大鼠急性肝損傷的作用，為山藥多糖的藥效提供理論依據(jù)。
　　方法:采用逆向蒸發(fā)-過(guò)膜擠壓法制備山藥多糖脂質(zhì)體，以包封率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，篩選山藥多糖脂質(zhì)體最優(yōu)制備處方。采用低溫-高速冷凍離心法測(cè)定

2、包封率，計(jì)算載藥量。運(yùn)用Nano-ZS90型激光散射粒度儀測(cè)定山藥多糖脂質(zhì)體粒徑、分散度及Zeta電位，Hitachi7700型透射電鏡觀察山藥多糖脂質(zhì)體形態(tài)體征，透析法考察山藥多糖脂質(zhì)體體外釋藥情況，運(yùn)用零級(jí)、一級(jí)、Higuchi、Hixcon-Crowell四種方程篩選山藥多糖脂質(zhì)體溶出曲線擬合方程。以表面色澤外觀、再分散性篩選凍干保護(hù)劑，并以包封率及復(fù)溶后粒徑來(lái)評(píng)價(jià)凍干粉穩(wěn)定性，通過(guò)包封率大小選擇凍干粉滅菌方法。將大鼠隨機(jī)分為正常

3、對(duì)照組、模型組、陽(yáng)性對(duì)照組、山藥多糖脂質(zhì)體高、中、低濃度組，每組10只，除正常對(duì)照組外，運(yùn)用四氯化碳原液腹腔注射復(fù)制大鼠急性肝損傷模型，24 h后采用大鼠尾靜脈注射給予山藥多糖脂質(zhì)體及陽(yáng)性藥物，7天后，腹主動(dòng)脈取血，測(cè)定 AST、ALT、AKP活性，取肝臟組織勻漿測(cè)定 MDA、T-SOD、GSH含量，固定肝臟右葉組織進(jìn)行HE染色，光鏡下觀察肝臟損傷程度。
　　結(jié)果:根據(jù)最優(yōu)處方制備的山藥多糖脂質(zhì)體的平均包封率為（83.29±2.1

4、3）％，載藥量為（3.83±0.11）%，粒徑為（121.6±2.7） nm，分散度（ PDI）為0.136±0.011，Zeta電位為（-31.8±0.69）mV。山藥多糖原料藥經(jīng)過(guò)6 h后釋放完全，而山藥多糖脂質(zhì)體6 h后累計(jì)釋放量為21%，36 h后累計(jì)釋放率僅為77.48%。采用濃度為5%的甘露醇為凍干保護(hù)劑效果最優(yōu)。與正常組相比，模型組大鼠的肝臟指數(shù)顯著增加，血清中 AST、ALT、AKP活性均明顯升高，肝臟中MDA含量升高，

5、T-SOD、GSH含量降低，且均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與模型組比較，當(dāng)給予不同劑量的山藥多糖脂質(zhì)體及異甘草酸鎂注射液后，大鼠血清中AST、ALT、AKP活性降低，具有極顯著性差異。其中山藥多糖脂質(zhì)體高濃度組對(duì) AST活性的抑制作用略強(qiáng)于陽(yáng)性藥物組，但無(wú)顯著差異。與模型組相比，肝組織勻漿中MDA含量降低，T-SOD、GSH含量均升高，但針對(duì)GSH指標(biāo)山藥多糖高、中、低濃度組間均無(wú)顯著性。病理切片結(jié)果顯示，模型組大鼠肝臟結(jié)構(gòu)完整性被破壞，出現(xiàn)肝細(xì)