簇毛麥6V染色體短臂結構變異體庫的構建.pdf

1、簇毛麥(Haynaldia villosa L.2n=14，VV)是一年生異花授粉草本植物，原產于地中海沿岸和高加索地區(qū)，是小麥的野生近緣物種，對白粉病、銹病、眼斑病及梭條花葉病等多種病害都具有抗性，同時還有密穗多花、抗寒、耐旱、籽粒的蛋白質含量高等特性，培育小麥—簇毛麥屬間染色體小片段易位，有助于更好地在小麥遺傳改良中利用簇毛麥的有益基因。為了更精確地定位抗白粉病基因Pm21，創(chuàng)造更多涉及6VS不同區(qū)段的結構變異體，創(chuàng)制片段更小的抗白

2、粉病易位系，本研究選擇以6VS/6AL易位系92R137的雌配子為輻射材料，利用分子細胞學方法對輻射后代進行鑒定，篩選涉及簇毛麥6V染色體短臂不同區(qū)段的結構變異體。在輻射后代中，通過根尖細胞有絲分裂中期染色體基因組原位雜交(GISH)技術的鑒定，共檢測到51株涉及簇毛麥6V染色體短臂的結構變異體，包括19個中間插入易位，20個頂端易位，8個缺失，4株其他結構變異類型。
　　 經比較遺傳作圖分析，小麥第6部分同源群染色體與水稻2號

3、染色體呈線性關系。通過比較基因組學設計引物95對，用中國春、簇毛麥、92R137、硬簇麥、De1.6VS-1和De1.6VS-2對這些引物進行篩選、定位。在6VS上發(fā)現12個特異性分子標記，加上前人在6VS上開發(fā)的8個特異性分子標記，在6VS上共得到20個特異性分子標記。用這些特異性分子標記，對結構變異體所涉及的簇毛麥6VS的變異區(qū)段進行鑒定，其中31個結構變異材料已經確定其外源片段的大小及斷點位置，覆蓋了簇毛麥6VS的不同區(qū)段，這些結

4、構變異體是構建“簇毛麥6V染色體短臂結構變異體庫”和進行物理作圖的重要材料。利用所獲得的6VS結構變異體并結合白粉病抗性鑒定，將抗白粉病基因Pm21定位在6VS上FL值為0.45-0.58的染色體區(qū)段上。
　　 經基因組原位雜交(GISH)技術鑒定，獲得了27個純合的結構變異體，利用三種重復序列(pAs1、pSc119.2、676D4)做探針的原位雜交技術對結構變異染色體的小麥染色體區(qū)段進行鑒定，其中13個純合材料能初步判斷其小