小麥—多年生簇毛麥異染色體系的篩選與準(zhǔn)確鑒定.pdf

1、多年生簇毛麥（D. breviaristatum）包括四倍體多年生簇毛麥（染色體組為VbVbVbVb）和二倍體多年生簇毛麥（染色體組為 VbVb），主要分布于西北非，希臘和摩洛哥，是小麥的珍稀野生近緣物種。因為多年生簇毛麥具有抗條銹病、抗白粉病、抗眼斑病、分蘗能力強、小穗數(shù)多、種子蛋白質(zhì)含量高等許多栽培小麥所需的農(nóng)藝性狀，所以是小麥改良育種優(yōu)良基因的重要來源。
　　為了進(jìn)一步向小麥轉(zhuǎn)移多年生簇毛麥基因組的優(yōu)異農(nóng)藝性狀，將小麥-多年

2、生簇毛麥與小麥雜交，進(jìn)而用小麥進(jìn)行回交，獲得了大量雜交后代。利用簇毛麥屬物種特異分子標(biāo)記 OPH12對小麥-多年生簇毛麥雜交后代進(jìn)行初步篩選，結(jié)果顯示，有60份材料含有簇毛麥異染色質(zhì)。醇溶蛋白A-PAGE電泳和谷蛋白SDS-PAGE電泳結(jié)果顯示，后代材料品系內(nèi)遺傳基本穩(wěn)定，品系之間多態(tài)性豐富，染色體重組類型多樣。多年生簇毛麥染色質(zhì)的滲入導(dǎo)致了蛋白編碼位點的變異，在醇溶蛋白α、β、γ、ω區(qū)域都有蛋白亞基的變異，谷蛋白高分子量區(qū)和低分子量區(qū)

3、出現(xiàn)新的亞基組合。結(jié)合1DS染色體上的分子標(biāo)記鑒定結(jié)果，發(fā)現(xiàn)10份材料缺失1DS染色體，7份材料缺失1BL染色體。
　　利用145對PLUG引物對小麥-多年生簇毛麥、一套小麥-簇毛麥附加系、一套小麥易位系及小麥對照進(jìn)行擴(kuò)增，共建立了13個簇毛麥染色體（臂）特異分子標(biāo)記。其中，13個標(biāo)記包括1VS標(biāo)記1個；1VL標(biāo)記2個；2VS標(biāo)記2個；3VL和3VS標(biāo)記各1個；4VL標(biāo)記2個；6VL標(biāo)記3個；7VL標(biāo)記1個。
　　利用擴(kuò)增效

4、果最好的2VS特異標(biāo)記 TNAC1142和7VL特異標(biāo)記 TNAC1811對后代材料進(jìn)行篩選。結(jié)果顯示，25份材料含有2VS異染色質(zhì)，1份含有7VL染色質(zhì)。利用基因組原位雜交技術(shù)對能擴(kuò)增出2VS的部分雜交后代材料進(jìn)行鑒定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，擴(kuò)增出2VS標(biāo)記的編號為V252的材料（2n=42）中有1對多年生簇毛麥染色體具有雜交信號，2V染色體的2個特異標(biāo)記均能對V252進(jìn)行擴(kuò)增，說明這對多年生簇毛麥染色體是2V染色體，而被2V代換掉的小麥染色體正