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文檔簡介
1、目的:通過對吸入不同濃度的七氟烷對APP/PS1雙轉基因小鼠的空間記憶能咯及海馬內β-淀粉樣蛋白(Aβ)和Tau蛋白磷酸化水平的影響,探討吸入麻醉藥是否會加速阿爾茲海默病模型小鼠認知損害及可能作用機制。
方法:7月齡野生型(Wild type group,WT組)和APP/PS1雙轉基因阿爾茲海默病模型小鼠隨機分為4組,分別給予吸入30%氧氣(CON組),2%七氟烷(2%Sev組)和3%七氟烷(3%Sev組)各4h。在一周及一
2、個月后分別選擇Morris水迷宮(Morris water maze,MWM)及連續(xù)多次被動逃避實驗(Continuous multiple inhibitory avoidance,CMIA)檢測其空間記憶能力。同時利用免疫組化和蛋白印跡法分別檢測小鼠海馬內Aβ斑塊數(shù)目,淀粉樣前體蛋白(APP)、磷酸化Tau(p-Tau)、海馬內突觸后致密物-95(PSD-95)以及突觸素(synaptophysin)蛋白水平的表達變化。
3、結果:MWM實驗:在麻醉一周后,7月齡APP/PS1小鼠(CON組)與同窩陰性小鼠(WT組)相比,空間記憶能力已經出現(xiàn)受損(p﹤0.05),而3%七氟烷處理以后,APP/PS1小鼠的記憶能力出現(xiàn)進一步的損傷(p﹤0.05)。 CMIA實驗:麻醉一個月后,3%Sev組小鼠的記憶潛伏期相較CON組明顯縮短(p﹤0.05),而2%Sev組與CON組相比則無統(tǒng)計學差異(p﹥0.05)。免疫組化結果:麻醉后一周,3%Sev組與空氣對照組(CON)
4、相比,Aβ和Aβ42斑塊數(shù)都顯著增加(p<0.05),而2%Sev組與CON組相比卻沒有統(tǒng)計學意義(p>0.05);麻醉一個月后,3%Sev組與CON組相比海馬中Aβ斑塊數(shù)量明顯增加(p<0.05),而2%組與CON組相比無顯著變化(p>0.05)。蛋白印記結果:麻醉一周后,2%Sev組和3%Sev組海馬內p-Tau水平與CON組相比,沒有統(tǒng)計學意義(p>0.05),但3%Sev組與CON組相比,APP水平明顯增高(p<0.05),而突
5、觸素和PSD-95水平明顯降低(p<0.05)。麻醉一個月后,3%Sev組與CON組相比,APP水平顯著增加(p<0.05),p-Tau水平明顯增加(p<0.05),PSD-95水平依然明顯降低(p<0.05),而2%Sev組與CON組相比,只有p-Tau水平明顯增加(p<0.05)。
結論:吸入3%七氟烷4h可以加劇七月齡APP/PS1阿爾茲海默病模型轉基因小鼠記憶損害,海馬區(qū)Aβ斑塊增多、突觸功能損害可能是潛在的機制之一。
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