vMIP-ⅡN端肽靶向PDGFRα逆轉(zhuǎn)乳腺癌EMT的機制研究.pdf

1、腫瘤轉(zhuǎn)移是臨床治療失敗和死亡的主要原因，研究其分子機制是開發(fā)治療措施，提高存活率的關(guān)鍵。上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)換(Epithelial-mesenchymal transition，EMT)是一個多基因參與的生物過程，在腫瘤細胞轉(zhuǎn)移和化療耐藥中發(fā)揮重要的作用，探討EMT的內(nèi)在調(diào)控機制具有重要的科學價值。紫杉醇(Paclitaxel，Taxol)為治療復(fù)發(fā)性或轉(zhuǎn)移性乳腺癌單藥及聯(lián)合用藥的一線化療藥物，其耐藥是導(dǎo)致乳腺癌化療失敗的巨大障礙。本研究旨在揭

2、示乳腺癌化療耐藥的分子機制，克服化療耐藥性，以獲得更好的臨床療效。
　　趨化因子受體CXCR4與其配體基質(zhì)細胞源性因子-1 alpha(stromalcell-derived factor-1 alpha，SDF-1α)相互作用能有效促進腫瘤細胞的增殖和侵襲，在乳腺癌器官特異性，如淋巴以及肺和骨髓的轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要的調(diào)控作用。CXCR4信號通路與紫杉醇耐藥、EMT形成機制存在Cross-talking，可作為臨床輔助化療的靶點。來源

3、于病毒巨噬細胞炎性蛋白Ⅱ(Virus macrophageinflammatory protein-Ⅱ，vMIP-Ⅱ)N末端21個氨基酸的多肽(NT21MP)，通過與SDF-1α競爭結(jié)合CXCR4受體，在乳腺癌細胞凋亡誘導(dǎo)和增殖抑制中發(fā)揮重要的作用。但其調(diào)控EMT的效應(yīng)和機制尚不清楚。血小板源性生長因子(Theplatelet-derived growth factor, PDGF)信號途徑通過調(diào)控細胞增殖、凋亡、遷移、趨化及EMT誘導(dǎo)

4、，促進了惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展。血小板源性生長因子受體-alpha（Platelet-derived growth factor receptor-alpha，PDGFRα）在乳腺癌中異常高表達，與EMT誘導(dǎo)相關(guān)，賦予腫瘤細胞耐藥表型和侵襲能力。
　　本研究首先利用生物信息學技術(shù)分析NT21MP結(jié)合CXCR4的關(guān)鍵氨基酸和理化性質(zhì);其次，以乳腺癌親本細胞株MCF-7，SKBR-3和MDA-MB-231，以及其紫杉醇耐藥細胞株（SKBR

5、-3/PR和MCF-7/PR）為研究對象，采用體外實驗和聯(lián)合免疫缺陷小鼠體內(nèi)乳腺癌耐藥模型進行研究。體內(nèi)實驗以SKBR-3/PR細胞構(gòu)建乳腺癌紫杉醇耐藥裸鼠模型，NT21MP通過尾靜脈注射，紫杉醇和生理鹽水通過腹腔注射;分析腫瘤重量、增殖凋亡活性、肺轉(zhuǎn)移和EMT標志物等蛋白表達改變;體外實驗中，利用熒光定量技術(shù)，Western blot法檢測基因表達，利用增殖、凋亡、遷移和趨化等實驗檢測生物學活性。
　　結(jié)果顯示SDF-1αN端L