miR-125a-5p通過調(diào)控IGSF3表達(dá)抑制食管鱗狀細(xì)胞癌遷移侵襲能力.pdf

1、背景:越來越多的證據(jù)表明，miR-125a-5p可以作為多種癌癥的腫瘤抑制基因;然而，其作用于食管鱗癌的機(jī)制知之甚少。
　　目的:
　　(1)篩選食管鱗癌患者中異常表達(dá)的miRNA及功能驗(yàn)證;
　　(2)探討miRNA潛在靶基因。
　　方法:
　　(1)應(yīng)用qRT-PCR檢測miRNA在ESCC中的表達(dá)水平;
　　(2)應(yīng)用體內(nèi)體外功能實(shí)驗(yàn)探究miRNA對ESCC生物學(xué)行為的影響;
　　(3)應(yīng)

2、用雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)對miRNA在ESCC中作用機(jī)制進(jìn)行初步研究。
　　結(jié)果:我們利用芯片檢測技術(shù)發(fā)現(xiàn)miR-125a-5p在食管鱗癌組織中的相對表達(dá)程度低于相應(yīng)的癌旁正常組織，并通過血清樣本對這一成果進(jìn)行了驗(yàn)證。另外發(fā)現(xiàn)，miR-125a-5p與T分期及臨床分期相關(guān)。進(jìn)一步的體內(nèi)體外功能實(shí)驗(yàn)證實(shí)，構(gòu)建過表達(dá)miR-125a-5p的TE-1和ECA109人食管鱗癌細(xì)胞系可抑制腫瘤細(xì)胞的增殖、G1/S期過渡、遷移和侵襲，同時(shí)也可促進(jìn)腫瘤

3、細(xì)胞的凋亡。更重要的是，IGSF3是免疫球蛋白超家族(IGSF)的一員，研究認(rèn)為它可以通過多種途徑參與腫瘤遷移和侵襲能力的調(diào)控。利用雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)證明IGSF3是miR-125a-5p的直接作用靶基因;通過將無3'-UTR區(qū)域的shRNA-IGSF3和miR-125a-5p mimics共轉(zhuǎn)染TE-1和ECA109細(xì)胞系進(jìn)行功能實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)1GSF3低表達(dá)能夠增強(qiáng)miR-125a-5p mimics對食管鱗癌細(xì)胞系遷移及侵襲能力抑制作用。