IDO在食管鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá).pdf

1、目的
　　食管癌鱗狀細(xì)胞癌，是一種具有高度侵襲性、致命性的全球性惡性腫瘤。在過去的三十年時(shí)間里，食管鱗狀細(xì)胞癌患者的長期生存率并沒有獲得實(shí)質(zhì)性的提高，食管鱗狀細(xì)胞癌預(yù)后仍然是所有癌癥里面期望生命值最差的癌癥。
　　研究表明，腫瘤細(xì)胞的生長、侵襲以及轉(zhuǎn)移不僅取決于腫瘤細(xì)胞本身，而且與他們周圍的微環(huán)境密切相關(guān)。已經(jīng)有實(shí)驗(yàn)證實(shí)腫瘤微環(huán)境間充質(zhì)細(xì)胞通過釋放生長因子、免疫調(diào)節(jié)分子以及建立新生血管及產(chǎn)生重塑酶來抑制機(jī)體免疫、促進(jìn)腫瘤細(xì)胞

2、的生長和發(fā)展。
　　吲哚胺2，3-雙加氧酶(IDO)是一種色氨酸降解的限速酶，目前被認(rèn)為是一種新的免疫抑制因子廣泛存在于各種類型的人類癌癥中，從而引起了醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域的廣泛關(guān)注。吲哚胺2，3雙加氧酶(IDO)蛋白合成的增加可抑制宿主自身的抗腫瘤免疫系統(tǒng)，進(jìn)而有助于癌細(xì)胞逃脫宿主免疫系統(tǒng)的攻擊。事實(shí)上，我們以前的研究中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)間充質(zhì)反應(yīng)在食管鱗狀細(xì)胞癌腫瘤微環(huán)境中的作用，其中包括腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞的顯著激活、微血管以及炎性細(xì)胞因子的生

3、產(chǎn)形成增加等相關(guān)表現(xiàn)。在不同癌癥中包括食管鱗狀細(xì)胞癌，都可發(fā)現(xiàn)一個(gè)顯著的間充質(zhì)反應(yīng)，即吲哚胺2，3雙加氧酶(IDO)的高表達(dá)。因此，我們大膽的推測高反應(yīng)性的腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞和微血管內(nèi)皮細(xì)胞通過在腫瘤間充質(zhì)中刺激釋放吲哚胺2，3雙加氧酶(IDO)，從而共同參與腫瘤免疫抑制微環(huán)境的形成。在本課題中，我們研究吲哚胺2，3雙加氧酶(IDO)在食管鱗狀細(xì)胞癌腫瘤微環(huán)境在腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞和微血管內(nèi)皮細(xì)胞上的表達(dá)。
　　實(shí)驗(yàn)方法:
　

4、　收集食管鱗狀細(xì)胞癌(ESCC)組織50例，正常食管組織（癌旁組織）10例，應(yīng)用免疫組化單染和雙染技術(shù)來檢測腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞(TAFs)、微血管和IDO在食管鱗狀細(xì)胞癌微環(huán)境（間充質(zhì)）中的表達(dá);免疫組化雙染來界定IDO和增值指數(shù)在食管鱗狀細(xì)胞癌微環(huán)境（間充質(zhì)）成纖維細(xì)胞(TAFs)和微血管上的表達(dá)。兩組間統(tǒng)計(jì)分析采用Mann-whitney檢驗(yàn)，應(yīng)用SPSS21.0軟件處理數(shù)據(jù)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)設(shè)定為α=0.05。
　　結(jié)果:
　

5、　(1)在食管鱗狀細(xì)胞癌的間充質(zhì)中我們能夠觀察到SMAα陽性的腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞。腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞分布于整個(gè)腫瘤間充質(zhì)中。半定量分級法判定SMAα陽性腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞表達(dá)含量，從而界定TAFs在腫瘤微環(huán)境中得表達(dá)密度，與正常組織相比，食管鱗狀細(xì)胞癌微環(huán)境中的SMAα陽性腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞表達(dá)密度顯著增加(P＜0.05)。
　　(2)通過不同組織中CD34標(biāo)記的腫瘤相關(guān)微血管表達(dá)，我們觀察到，與正常組織相比ESCC腫瘤間充質(zhì)中有

6、更高密度的微血管。統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示在ESCC腫瘤微環(huán)境中有顯著增加的微血管密度(P＜0.05)。
　　(3)與正常組織相比，食管鱗狀細(xì)胞癌腫瘤微環(huán)境（間充質(zhì)）中可以觀察到高表達(dá)的IDO。從形態(tài)上來看，多數(shù)高表達(dá)IDO的細(xì)胞可以被認(rèn)定為TAFs以及微血管。半定量分級法判定IDO表達(dá)含量，食管鱗狀細(xì)胞癌間充質(zhì)中TAFs及微血管中IDO陽性表達(dá)量均顯著高于正常食管組織間充質(zhì)(P＜0.05)。
　　(4)采用免疫組化雙染的技術(shù)對ESCC

7、微環(huán)境中TAFs和微血管的增殖活動(dòng)進(jìn)行效果評價(jià)。結(jié)果顯示增殖細(xì)胞核抗原的免疫反應(yīng)可以在SMAα陽性的TAFs中和CD34陽性的微血管內(nèi)皮細(xì)胞上頻繁的觀察到，可有效評價(jià)這兩種細(xì)胞的增殖活性。同樣采用免疫組化雙染方法對IDO在ESCC腫瘤間充質(zhì)TAFs和微血管內(nèi)皮細(xì)胞中的表達(dá)進(jìn)行進(jìn)一步研究。結(jié)果顯示在ESCC腫瘤間充質(zhì)中IDO的陽性反應(yīng)經(jīng)常與SMAα陽性的TAFs和CD34陽性的微血管內(nèi)皮細(xì)胞共同表達(dá)。
　　結(jié)論:
　　ESCC