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文檔簡介
1、目的:了解口腔扁平苔蘚(OLP)患者外周血中Th17/Treg的平衡狀況,以及探討IL-35對OLP患者Th17/Treg平衡的影響。
方法:1.OLP患者12例(非糜爛型4例,糜爛型8例)和健康對照13例。無菌提取外周血的單個核細胞(PBMCs),通過流式細胞儀(FCM)分選出CD4+T細胞后,先采用Real-time PCR方法檢測Foxp3與RORγt表達情況;然后通過加入/不加入rIL-35在體外進行培養(yǎng),培養(yǎng)結束后收
2、集培養(yǎng)細胞,采用Real-time PCR方法檢測上述相同因子的表達水平。2.OLP患者15例(非糜爛型6例,糜爛型9例)和健康對照14例。無菌提取外周血的單個核細胞(PBMCs),通過流式細胞儀(FCM)分選出CD4+CD25+T細胞,先采用Real-time PCR和ELISA方法分別檢測Foxp3、EBI3、p35和IL-10的表達情況;然后通過加入/不加入rIL-35在體外進行培養(yǎng),培養(yǎng)結束后收集細胞及培養(yǎng)上清,采用Real-t
3、ime PCR和ELISA方法檢測上述相同因子的表達水平。
結果:1.(1)OLP患者CD4+T細胞中Foxp3和RORγt mRNA的表達水平均高于正常對照組(p<0.05),在糜爛型OLP組中RORγt/Foxp3 mRNA比值高于非糜爛型OLP組和正常對照組(p<0.05),Spearman相關性分析顯示該比值與癥狀記分呈正相關關系(r=0.661,p=0.019);(2)在健康者CD4+T細胞中,加入rIL-35后Fo
4、xp3 mRNA表達下調(diào)(p<0.05),RORγt mRNA表達差異不明顯(p>0.05),RORγt/Foxp3 mRNA比值在加入rIL-35后上升(p<0.05);(3)在糜爛型OLP組CD4+T細胞中,加入rIL-35后Foxp3 mRNA表達上調(diào)(p<0.05),RORγt mRNA表達差異不明顯(p>0.05),RORγt/Foxp3 mRNA比值在加入rIL-35后下降(p<0.05),而在非糜爛型OLP組中作用不明顯(
5、p>0.05)。2.(1)OLP患者外周血Tregs細胞中Foxp3、EBI3、p35 mRNA和IL-10的表達水平均高于正常對照組(p<0.05);(2)在健康者Tregs細胞中,加入rIL-35后Foxp3 mRNA和IL-10的表達均下調(diào)(p<0.05),IL-35的兩個亞基EBI3、p35 mRNA在加入rIL-35后表達也降低(p<0.05);(3)而在OLP組Tregs細胞中,加入rIL-35后Foxp3 mRNA和IL-
6、10的表達均上調(diào)(p<0.05),IL-35的兩個亞基EBI3、p35mRNA在加入rIL-35后表達也升高(p<0.05)。
結論:1.在OLP外周血中Th17和Tregs細胞的表達均升高,其都參與了OLP的發(fā)病過程,并且存在著以Th17細胞占優(yōu)勢的Th17/Treg失衡,推測該失衡與OLP長期形成的慢性炎癥有關。2.外源性IL-35在健康者和OLP患者中影響不同,在健康人群中,其可以下調(diào)Tregs細胞的表達,同時也降低了I
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