口腔扁平苔蘚動(dòng)物模型的建立及口腔扁平苔蘚患者唾液酶、IL-18的檢測(cè)及臨床意義.pdf

1、口腔扁平苔蘚(oral lichen planus OLP)是常見的口腔黏膜疾病之一，是一種頑固難治的口腔黏膜疾病，其發(fā)病機(jī)制尚未明確。在治療方面，國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)其進(jìn)行了大量的基礎(chǔ)與臨床研究，但目前臨床上還沒有一種特效的治療口腔扁平苔蘚的方法，國(guó)內(nèi)外對(duì)口腔扁平苔蘚的研究尚未取得突破性進(jìn)展。究其原因，很重要的一點(diǎn)是尚未建立起理想的動(dòng)物模型進(jìn)行深入研究。因此，對(duì)于口腔扁平苔蘚動(dòng)物模型的建立成為當(dāng)前研究的熱點(diǎn)。
　　口腔黏膜長(zhǎng)期處于唾液包

2、繞的環(huán)境中，OLP作為一種口腔黏膜疾病，其與唾液關(guān)系密切。OLP發(fā)生時(shí)，可能會(huì)引起唾液中某些成分的變化。唾液具有收集方法簡(jiǎn)便，對(duì)人體不會(huì)造成傷害，易于被患者接受等優(yōu)點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)通過全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定OLP患者治療前后及健康人唾液中ALT、AST、LDH的含量，探討OLP與其之間的關(guān)系，尋求OLP診斷的實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。同時(shí)，通過免疫組化方法分析OLP患者病變組織與正?？谇火つぶ蠭L-18的表達(dá)來(lái)判斷IL-18是否與扁平苔蘚的發(fā)生有關(guān)，以進(jìn)一步

3、研究OLP的發(fā)病機(jī)制，尋求OLP的特效治療方法。
　　第一部分:口腔扁平苔蘚動(dòng)物模型的建立
　　目的:通過將口腔扁平苔蘚患者病變組織勻漿局部注射及針刺劃痕到金黃地鼠頰囊黏膜與背部皮膚的方法建立口腔扁平苔蘚的動(dòng)物模型。
　　方法:取OLP患者病變組織少許制成組織勻漿。選取SPF級(jí)LVG敘利亞金黃地鼠10只，鼠齡六周，體質(zhì)量為150g左右。將其隨機(jī)分為5組，每組2只。第1組為空白對(duì)照組，第2、3組采用口腔黏膜下和背部皮膚皮

4、下注射法，第4、5組采用口腔黏膜與背部皮膚表皮針刺劃痕法。第2、4組處理2周后處死，于口腔黏膜及背部皮膚處取材，第3、5組處理4周后處死，于口腔黏膜及背部皮膚處取材。制成HE染色切片光學(xué)顯微鏡下觀察有無(wú)病理變化。
　　結(jié)果:采用組織勻漿局部注射法金黃地鼠，肉眼觀實(shí)驗(yàn)部位與空白對(duì)照組無(wú)明顯差異，鏡下觀察在皮膚深層附屬器以下可見血管增生及炎細(xì)胞浸潤(rùn)，口腔黏膜下層出現(xiàn)炎細(xì)胞浸潤(rùn)的病理變化;針刺劃痕法金黃地鼠肉眼觀實(shí)驗(yàn)部位皮膚顏色較空白對(duì)

5、照組深，表皮輕度剝脫，口腔黏膜與空白對(duì)照組相同，鏡下觀察在皮膚表皮層可見上皮細(xì)胞增生及表皮下炎細(xì)胞浸潤(rùn)，口腔黏膜層出現(xiàn)上皮細(xì)胞增生、上皮下慢性炎細(xì)胞浸潤(rùn)的病理變化，且4周組炎細(xì)胞較2周組明顯增多。
　　結(jié)論:
　　1采用金黃地鼠頰囊黏膜與背部皮膚局部注射及針刺劃痕OLP病變組織勻漿的方法均未能建立起OLP動(dòng)物模型，僅使實(shí)驗(yàn)部位出現(xiàn)慢性炎癥的病理表現(xiàn)。對(duì)于OLP動(dòng)物模型的建立方法還需進(jìn)一步改進(jìn)。
　　2針刺劃痕法出現(xiàn)的上

6、皮細(xì)胞增生、炎細(xì)胞浸潤(rùn)發(fā)生于口腔黏膜層及皮膚表皮與真皮層，與OLP上皮棘細(xì)胞層增生、固有層淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)的病理表現(xiàn)更加接近。
　　第二部分:口腔扁平苔蘚患者唾液酶、IL-18的檢測(cè)及臨床意義
　　目的:通過對(duì)谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、乳酸脫氫酶(LDH)在口腔扁平苔蘚患者治療前后及健康人唾液中含量的檢測(cè)來(lái)分析其是否與OLP的發(fā)生有關(guān)。并通過檢測(cè)IL-18在OLP病變組織和正?？谇火つそM織中的表達(dá)來(lái)分析其在OL

7、P發(fā)生、發(fā)展過程中的作用。
　　方法:應(yīng)用全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定30例口腔扁平苔蘚患者治療前后及健康人唾液中ALT、AST、LDH的含量。應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)IL-18在30例口腔扁平苔蘚組織及20例正?？谇火つそM織標(biāo)本中的表達(dá)情況，分析IL-18在這兩種組織中的表達(dá)差異。
　　結(jié)果:
　　1口腔扁平苔蘚患者治療前唾液中ALT、AST水平與健康對(duì)照組及治療后相比均無(wú)明顯差異(P＞0.05);治療前唾液LDH水平明顯高

8、于健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，治療后明顯降低(P＜0.01)。
　　2免疫組化結(jié)果顯示IL-18在正?？谇火つそM織、OLP組織中均有表達(dá)，表現(xiàn)為細(xì)胞漿黃染。IL-18在口腔扁平苔蘚組中的表達(dá)明顯高于正?？谇火つ?Z=-4.314，P=0.000)。
　　結(jié)論:
　　1唾液中ALT、AST水平與OLP無(wú)明顯關(guān)系;唾液中LDH含量升高，可能與OLP的發(fā)生有關(guān)。
　　2 IL-18在口腔扁平苔蘚組中的