NOP14對胰腺癌侵襲轉(zhuǎn)移的調(diào)控作用及其相關(guān)分子機(jī)制和預(yù)后價(jià)值研究.pdf

1、腫瘤轉(zhuǎn)移是導(dǎo)致胰腺癌患者預(yù)后差的關(guān)鍵因素。p53突變體的富集可以促進(jìn)腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移，然而，目前有關(guān)胰腺癌中突變型p53蛋白富集及相關(guān)信號通路持續(xù)活化的分子機(jī)制仍不清楚。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)核仁蛋白14(NOP14)在胰腺癌轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮重要功能，至今有關(guān)NOP14表達(dá)異常與惡性腫瘤發(fā)生及進(jìn)展的關(guān)系鮮有報(bào)道。
　　本研究主要分為三個(gè)部分:功能研究篇首先利用免疫組織化學(xué)方法檢測了配對的胰腺導(dǎo)管腺癌原發(fā)灶、轉(zhuǎn)移灶及癌旁組織中NOP14

2、的表達(dá)，進(jìn)而在體外水平利用劃痕實(shí)驗(yàn)、Transwell侵襲和遷移實(shí)驗(yàn)研究NOP14對細(xì)胞運(yùn)動(dòng)能力的影響，并進(jìn)一步在體內(nèi)水平通過建立胰腺癌小鼠皮下和原位移植瘤模型及尾靜脈注射模型系統(tǒng)探究NOP14在胰腺癌侵襲轉(zhuǎn)移中的功能。機(jī)制探索篇首先利用RNA-seq分析聯(lián)合qPCR驗(yàn)證篩選和鑒定NOP14功能發(fā)揮的下游靶點(diǎn)，并進(jìn)一步利用RNA穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)、熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)及染色質(zhì)免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)等深入闡釋NOP14、p53突變體、miR-17-5p和

3、P21等相關(guān)信號分子之間的調(diào)控作用，最終揭示NOP14介導(dǎo)胰腺癌轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制。預(yù)后分析篇利用組織芯片探討了胰腺癌中NOP14表達(dá)與臨床病理參數(shù)之間的相關(guān)性及其預(yù)后價(jià)值。
　　功能研究發(fā)現(xiàn)NOP14在胰腺導(dǎo)管腺癌及其轉(zhuǎn)移灶中的表達(dá)水平明顯升高，上調(diào)NOP14表達(dá)促進(jìn)了胰腺癌細(xì)胞侵襲和遷移，反之抑制其表達(dá)則導(dǎo)致細(xì)胞的侵襲和遷移明顯下降，體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果亦表明NOP14是一種介導(dǎo)胰腺癌侵襲和轉(zhuǎn)移的正調(diào)控因子。機(jī)制探索方面，證實(shí)miR-17

4、-5p/P21信號通路是介導(dǎo)NOP14功能發(fā)揮的下游分子，NOP14可以通過與p53突變體mRNA結(jié)合增強(qiáng)其穩(wěn)定性實(shí)現(xiàn)對下游miR-17-5p/P21信號通路的調(diào)控。預(yù)后分析表明NOP14高表達(dá)與胰腺癌局部侵襲和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，是胰腺癌患者預(yù)后不良的危險(xiǎn)因素。
　　本研究闡釋了NOP14在p53突變驅(qū)動(dòng)的胰腺癌轉(zhuǎn)移中的功能和分子機(jī)制，加深了對胰腺癌細(xì)胞中突變型p53蛋白富集及其相關(guān)信號通路持續(xù)活化機(jī)制的理解。靶向抑制NOP14