UHPLC-MS-MS法同時測定中藥多種有效成分在大鼠體內(nèi)的血藥濃度及其藥代動力學研究.pdf

1、中藥具有多組分和多靶點的特點，且其組分的含量和性質(zhì)差異大，增加了中藥作用機制研究的難度。UHPLC-MS/MS具有高分離效能、高通量、高靈敏度和特異性強的特點，且樣品預處理簡單、分析速度快，是中藥有效成分分析和藥代動力學研究的重要手段之一。本課題利用UHPLC-MS/MS技術，建立了同時測定中藥復方制劑中多種組分在大鼠體內(nèi)血藥濃度的分析方法并初步研究其藥代動力學行為，為了解中藥的血藥濃度變化提供參考，有助于闡明中藥的藥效機理，對中藥的合

2、理使用具有十分重要的意義。研究主要的內(nèi)容及結果如下:
　　1.建立了以延胡索乙素和蘆丁為內(nèi)標同時測定炎可寧膠囊中的黃柏堿、黃連堿、藥根堿、小檗堿、巴馬汀、黃芩苷、漢黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素和大黃素10種有效成分在大鼠體內(nèi)血藥濃度的UHPLC-MS/MS分析方法，并對灌胃給藥后各組分的藥動學行為進行初步研究。用700μL90％的無水乙醇-乙腈對血漿樣品進行沉淀蛋白，流動相中的水相為含0.3％甲酸的超純水，有機相為甲醇，以梯度進行洗脫

3、，信息采集與定量使用多重反應監(jiān)測模式，0.50、0.50、0.30、0.30、0.30、10、3.0、8.0、1.0、8.0μg·L-1分別為10種有效組分的定量下限，提取回收率在79.6％～113％，方法回收率在90.0％～109％，符合生物樣品分析指導原則的要求。
　　2.利用UHPLC-MS/MS技術，建立了采用表兒茶素和淫羊藿苷為內(nèi)標同時測定小兒解表顆粒中酚酸類、黃酮類、色原酮類和木酯素類等14種有效成分在大鼠體內(nèi)血藥濃度

4、及其藥代動力學研究的分析方法。血漿樣品經(jīng)350μL90％的甲醇-無水乙醇沉淀蛋白，采用電噴霧電離(ESI)正負離子切換，多重反應監(jiān)測模式進行定量測定，14種有效成分的定量下限分別為20、10、80、0.1、0.02、0.1、0.1、1.0、20、6.0、20、50、3.0、2.0μg·L-1，精密度高，穩(wěn)定性好。該方法簡便、快速，已成功用于小兒解表顆粒中14種組分在大鼠體內(nèi)的血藥濃度測定和藥代動力學的研究。
　　3.建立了以迷迭香

5、酸和聯(lián)苯雙酯為內(nèi)標同時測定健腦安神片中的原兒茶酸、原兒茶醛、綠原酸、咖啡酸、表兒茶素、蘆丁、異綠原酸C、人參皂苷Re、肉桂酸、淫羊藿苷、人參皂苷Rb1、細葉遠志皂苷、五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素和五味子乙素16種有效成分在大鼠體內(nèi)血藥濃度的UHPLC-MS/MS分析方法，以水相為含0.1％甲酸的超純水，有機相為乙腈，進行梯度洗脫，16種組分和2種內(nèi)標在19 min內(nèi)完全分離，各組分的定量下限分別為10、5.0、8.0、45、0.4