菝葜抗炎有效成分在大鼠腸外翻試驗中的吸收特性考察及其藥代動力學研究.pdf

1、菝葜又名金剛藤，其藥用部位為百合科植物菝葜Smilax china L.的干燥根莖，具有祛風利濕、解毒散瘀的功效，中醫(yī)臨床主要用于治療各種婦科炎癥和其它炎癥，療效顯著。菝葜含有多種天然有機成分，包括黃酮類、皂苷類、植物甾醇類、芪類、萜類、有機酸、氨基酸、鞣質(zhì)等。課題組前期研究表明，皂苷和黃酮類成分是菝葜主要的抗炎有效物質(zhì)部位?；谡n題組前期對菝葜抗炎有效部位群血清藥化及活性成分篩選研究的結(jié)果，本論文以菝葜主要抗炎有效成分為研究對象，對其

2、進行了體外腸外翻吸收特性考察及藥代動力學研究，將為菝葜有效部位新劑型研究和指導臨床安全用藥提供科學依據(jù)。本論文主要研究內(nèi)容如下：
　?。?）體外腸吸收特性考察
　　考察菝葜抗炎有效部位群中6種成分的體外腸吸收特征，為該部位的制劑開發(fā)及藥代動力學研究提供參考。采用大鼠腸外翻模型，通過HPLC測定不同取樣時間腸內(nèi)液中白藜蘆醇苷、落新婦苷、氧化白藜蘆醇、槲皮苷、黃杞苷、白藜蘆醇的含量，考察6個成分在不同腸段（十二指腸、空腸和回腸）

3、的吸收情況。結(jié)果顯示，白藜蘆醇苷在各腸段吸收無明顯差異，而其他5種成分在各腸段的吸收差異較大；6種成分在同一腸段的吸收有較大差異，在十二指腸、空腸和回腸中的吸收率分別為0.85％~2.79%，0.70%~2.73%和0.90%~1.77%。槲皮苷在十二指腸和空腸的吸收率最高，白藜蘆醇苷在回腸的吸收率最高；氧化白藜蘆醇吸收速度明顯比其他5種成分慢，在十二指腸中于90 min后才表現(xiàn)出較明顯的吸收。結(jié)果表明，白藜蘆醇苷、落新婦苷、槲皮苷、黃

4、杞苷、白藜蘆醇在大鼠離體小腸的吸收為一級動力學過程，但菝葜抗炎有效部位群提取物整體腸吸收率偏低，可能是其水溶性差，在腸液中溶解度低導致其吸收障礙，提示制劑研究中應考慮采用適當方法改善原料溶解性以提高其生物利用度。
　?。?）藥代動力學研究
　　首次建立了同時測定落新婦苷、白藜蘆醇、黃杞苷和白藜蘆醇苷的UPLC-MS/MS法，以葛根素為內(nèi)標，采用ESI源負離子模式，多反應離子監(jiān)測（MRM）進行分析。待測物的回收率在82%~97

5、%之間，方法的專屬性、基質(zhì)效應、精密度、準確度和穩(wěn)定性均符合生物樣品分析要求。采用所建立的方法測定了正常大鼠和盆腔炎模型大鼠灌胃給予菝葜提取物后4種成分的血漿濃度，獲得了其在正常大鼠和模型大鼠體內(nèi)的藥動學參數(shù)，比較了4種菝葜抗炎有效成分在正常和病理條件下的體內(nèi)過程。結(jié)果表明，4種物質(zhì)在正常大鼠和模型大鼠體內(nèi)的藥代C-T過程均符合二室模型，但藥代動力學行為存在差異。病理條件下，機體對落新婦苷的吸收能力減弱，消除速率降低；對黃杞苷的吸收能力

6、降低，消除速率加快；對白藜蘆醇的吸收能力增強，消除速率加快；對白藜蘆醇苷的吸收能力增強，消除速率減慢，提示菝葜抗炎活性成分藥代動力學研究應以模型動物為宜。
　?。?）血漿蛋白結(jié)合率的測定
　　采用超濾法結(jié)合超高效液相-質(zhì)譜聯(lián)用法，建立了同時測定大鼠血漿中花旗松素、白藜蘆醇、黃杞苷、槲皮素、槲皮苷、白藜蘆醇苷6種菝葜抗炎有效成分的UPLC-MS/MS分析方法，考察了該6種成分血漿蛋白結(jié)合情況。研究結(jié)果顯示，各檢測物在高、中、低