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1、N-甲基-D-天門冬氨酸(NMDA受體)在學(xué)習(xí)記憶過程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。近年來(lái)研究表明,組蛋白乙?;陂L(zhǎng)時(shí)記憶的形成和鞏固中也起重要作用,并與NMDA受體密切相關(guān)。但是組蛋白乙?;谟洃浿械淖饔檬欠衽cNMDA受體的NR2B亞基有關(guān),目前還不清楚。
因此,本論文利用前腦NR2B過表達(dá)的轉(zhuǎn)基因小鼠,通過生化分析、westernblot和熒光定量PCR方法分別檢測(cè)條件性恐懼訓(xùn)練前后的NR2B小鼠和對(duì)照小鼠海馬和皮層中組蛋白乙?;?/p>
2、轉(zhuǎn)移酶(HAT)和組蛋白去乙?;?HDAC)活性變化、皮層中的組蛋白H3乙?;降淖兓虴RK磷酸化的變化情況以及海馬和皮層中一些相關(guān)基因的mRNA的變化情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn)無(wú)論是否給予條件性恐懼訓(xùn)練,NR2B過表達(dá)對(duì)小鼠海馬和皮層的HAT和HDAC活性均無(wú)影響。但是,未給予訓(xùn)練的NR2B轉(zhuǎn)基因小鼠皮層中的組蛋白H3乙?;土姿峄疎RK水平均明顯高于野生型對(duì)照小鼠;而訓(xùn)練后,兩組小鼠皮層中組蛋白H3乙?;綗o(wú)明顯差異。但是,兩種小鼠皮層
3、中的磷酸化ERK水平在訓(xùn)練后均出現(xiàn)下降。此外,熒光定量PCR的結(jié)果表明,未受訓(xùn)練的野生型小鼠皮層中BDNF、CREB1的表達(dá)水平明顯高于NR2B轉(zhuǎn)基因小鼠,而在訓(xùn)練7天后NR2B小鼠海馬和皮層中的BDNF、海馬CREB1的表達(dá)水平顯著高于野生型小鼠。SYP基因在兩組小鼠海馬和皮層中的表達(dá)無(wú)差異,但是訓(xùn)練后1小時(shí)和24小時(shí)后的海馬中,野生型小鼠高于NR2B小鼠,而在訓(xùn)練后1小時(shí)的皮層中,NR2B小鼠高于野生型小鼠。而對(duì)NeuroD1表達(dá)無(wú)
4、影響。這提示NR2B過表達(dá)會(huì)對(duì)組蛋白乙?;^程產(chǎn)生影響,但是對(duì)基因表達(dá)的影響很復(fù)雜,并且在不同的部位影響方式不同。
為進(jìn)一步確定組蛋白乙?;贜MDA受體依賴的記憶中的作用,將NR2B轉(zhuǎn)基因小鼠和對(duì)照小鼠分別給予HDAC抑制劑丁酸鈉處理1天和7天后,利用新物體識(shí)別和條件性恐懼訓(xùn)練的行為學(xué)方法,檢測(cè)組蛋白去乙?;敢种苿?duì)NR2B小鼠和對(duì)照小鼠記憶的影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn)給予HDAC抑制劑1天的處理對(duì)兩組小鼠的新物體再認(rèn)記憶均無(wú)影響
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