組蛋白去乙?；冈谑吃葱糟U暴露導(dǎo)致的學(xué)習(xí)記憶損傷中的負(fù)調(diào)控機(jī)制.pdf

1、食品中的重金屬鉛污染影響食品的品質(zhì)與安全。多項(xiàng)研究已證實(shí)鉛暴露可影響神經(jīng)系統(tǒng)，進(jìn)而引發(fā)學(xué)習(xí)記憶和認(rèn)知功能的障礙。最近幾年國(guó)內(nèi)和國(guó)外關(guān)于鉛的中毒機(jī)制研究也越來(lái)越多，然而，對(duì)于表觀遺傳調(diào)控是否參與鉛暴露致使的學(xué)習(xí)記憶能力障礙的過(guò)程仍然不明確。
　　目的:探究鉛暴露導(dǎo)致的神經(jīng)毒性中組蛋白去乙?；傅恼{(diào)控機(jī)制，為臨床治療鉛中毒提供理論依據(jù)。
　　方法:1.研究鉛暴露對(duì)組蛋白H3賴氨酸第9位點(diǎn)的乙酰化(Ac-H3K9)水平的影響。以P

2、C12細(xì)胞代替大鼠神經(jīng)元細(xì)胞，10μM鉛暴露24h。觀察細(xì)胞突起生長(zhǎng)檢測(cè)毒性影響，Western Blot檢測(cè)Ac-H3K9水平，免疫共沉淀(CHIP)檢測(cè)Ac-H3K9對(duì)目標(biāo)基因的修飾，藥理學(xué)干擾通過(guò)添加去乙?；?HDACs)抑制劑確定Ac-H3K9變化原因;2探究鉛暴露對(duì)去乙?；?(HDAC2)水平的影響?；蚯玫虷DAC2檢測(cè)其對(duì)Ac-H3K9水平的影響，CHIP檢測(cè)HDAC2上游調(diào)控分子;3.從整體動(dòng)物及細(xì)胞兩個(gè)方面研究鉛暴

3、露去乙?；?/2(HDAC1/2)的作用。細(xì)胞上，免疫熒光及免疫共沉淀檢測(cè)復(fù)合體HDAC1/2，基因敲低HDAC1/2檢測(cè)其對(duì)Ac-H3K9水平的影響。SD鼠從孕期開始通過(guò)自由飲水的方式暴露濃度為250ppm的鉛直到兩個(gè)月。立體定位注射AAV病毒敲低HDAC1/2，Western Blot檢測(cè)Ac-H3K9、去乙?；?(HDAC1)、HDAC2水平，行為學(xué)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)SD鼠學(xué)習(xí)記憶能力，高爾基染色檢測(cè)樹突棘密度。
　　結(jié)果:1鉛暴

4、露顯著損傷PC12細(xì)胞的突起，增加HDACs的基因表達(dá)，降低Ac-H3K9水平，減少Notch2的表達(dá)。2.鉛暴露顯著增加HDAC2表達(dá)。敲低HDAC2可回復(fù)Ac-H3K9水平和修復(fù)損傷的突起。3HDAC1、HDAC2形成一個(gè)復(fù)合物HDAC1/2，當(dāng)鉛暴露后敲低HDAC1/2，細(xì)胞上顯著回復(fù)Ac-H3K9水平和修復(fù)損傷的突起，動(dòng)物上顯著增加樹突棘密度及彌補(bǔ)空間記憶能力的缺陷。
　　結(jié)論:鉛暴露造成的神經(jīng)毒性是通過(guò)影響HDAC1/2