組蛋白去乙?；冈贛PP+誘導(dǎo)PC12細胞凋亡中的作用研究.pdf

1、目的：
　　1．觀察MPP+對PC12細胞的存活率、凋亡率的影響，分析MPP+處理后I型組蛋白去乙?；傅谋磉_水平以及組蛋白乙?；降淖兓?；
　　2．觀察組蛋白去乙酰化酶抑制劑丙戊酸（VPA）對MPP+所致PC12細胞凋亡的抑制作用；
　　3．觀察MPP+對帕金森病致病蛋白α-sy nuclein轉(zhuǎn)錄及表達水平的影響，并分析丙戊酸的拮抗作用。
　　方法：
　　1.分別用不同濃度的MPP+（100、300、

2、500μmol/L）處理PC12細胞48h，MTT法檢測細胞存活率，流式細胞技術(shù)檢測細胞凋亡率，Western blot分析C as pase3、Acetyl-H3、Acetyl-H4以及 HDAC1、2、3、8表達水平的變化；
　　2. HDAC抑制劑丙戊酸（VPA）預(yù)處理PC12細胞30min，然后給予MPP+處理48h，MTT法檢測細胞存活率，Western blot檢測c as pase3、Acetyl-H3、Acetyl

3、-H4的表達水平；
　　3. HDAC抑制劑丙戊酸（VPA）預(yù)處理PC12細胞30min，然后給予MPP+處理48h，real-time RT-PCR分析α-sy nuclein轉(zhuǎn)錄水平的變化，Western blot檢測α-sy nuclein表達水平的變化。
　　結(jié)果：
　　1．不同濃度的MPP+處理PC12細胞48h后，隨著藥物濃度的增加細胞存活率顯著降低（P<0.001），細胞凋亡率升高（P<0.001）；C

4、as pase3被剪切激活，Acetyl-H3、Acetyl-H4的表達下降，HDAC1、2、3、8表達升高；
　　2．1.0 m mol/L的 VPA可顯著提高細胞的存活率（P<0.001）、降低細胞凋亡率（P<0.05）；C as pase3的活化受到抑制，Acetyl-H3、Acetyl-H4的表達升高；
　　3．1.0 m mol/L的VPA預(yù)處理后，α-sy nuclein的轉(zhuǎn)錄及表達水平均顯著降低（P<0.01)