青海省60歲以上藏族阿爾茨海默病患病率及影響因素研究.pdf

1、背景和目的:
　　老年認(rèn)知功能障礙是常見(jiàn)的神經(jīng)系統(tǒng)退行性病變，是僅次于腦血管病的最常見(jiàn)神經(jīng)科疾病。Prince等報(bào)告的meta-分析表明，世界大多數(shù)地區(qū)60歲以上癡呆標(biāo)化患病率為5％-7％，其中拉丁美洲(8.5％)最高，非洲地區(qū)(2％-4％)最低，這項(xiàng)研究表明，在不同種族之間，癡呆患病率可能不同。同時(shí)，Zhang等所做的meta-分析表明中國(guó)60歲以上老年人癡呆及阿爾茨海默病(AD)患病率分別為3.0％、1.9％，且此研究納入了從

2、1980-2010年間中國(guó)所有有關(guān)于癡呆流行病學(xué)調(diào)查的文獻(xiàn)。
　　不同種族之間基因存在一定差異，各民族在高原缺氧狀態(tài)下具有不同的遺傳背景。高原居民特有的體質(zhì)特征與特有的基因有關(guān)，在西藏、青海和云南不同藏族的ATP6、ATP8和Cytb基因比較研究中發(fā)現(xiàn)，ATP6基因頻率可能存在適應(yīng)性選擇并隨海拔高度增高，呈現(xiàn)出選擇性增強(qiáng)趨勢(shì)。西藏人口(Sherpa地區(qū))eNOS的兩個(gè)位點(diǎn)頻率比低海拔地區(qū)高，在與缺氧有關(guān)的2個(gè)基因EPAS1和EGL

3、N1選擇性掃描中發(fā)現(xiàn)了強(qiáng)信號(hào)，這兩個(gè)基因與非藏族的低海拔地區(qū)人群（漢族與日本人）明顯不同。因此我們懷疑與老年癡呆發(fā)病相關(guān)的基因位點(diǎn)中藏族亦有可能與其他種族不同，本研究選取rs1113600等13個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行病例對(duì)照研究。
　　方法:
　　1. 2014年5月至9月，研究組在青海省60歲以上的藏族老年人中進(jìn)行多階段整群隨機(jī)抽樣流行病學(xué)調(diào)查。第一步，在青海省隨機(jī)抽取4個(gè)藏族聚集較多的市。第二步，在4個(gè)市中隨機(jī)抽取6個(gè)縣。第三步，在

4、6個(gè)縣中隨機(jī)抽取65個(gè)藏族村。在調(diào)查人群選擇過(guò)程中，所有入選人群都必須是60歲以上且有人口資料顯示在本地至少居住10年以上的藏族人(n=4506)，不在村中而在敬老院居住的老人研究小組同樣進(jìn)行了走訪。為了保證最大的調(diào)查參與率，在一些交通不便的牧區(qū)進(jìn)行了上門走訪。但對(duì)于拒絕參與篩查、死亡、無(wú)法找到以及患有危急重癥的村民沒(méi)有納入。每個(gè)調(diào)查小組針對(duì)被篩查對(duì)象及其陪護(hù)人進(jìn)行訪問(wèn)，整個(gè)訪問(wèn)過(guò)程持續(xù)0.5-1個(gè)小時(shí)，主要用于采集病人詳細(xì)的個(gè)人資料、

5、既往史、家族史、現(xiàn)病史及主要生活習(xí)慣、情緒變化。同時(shí)，對(duì)病人進(jìn)行系列神經(jīng)心理學(xué)測(cè)試和神經(jīng)系統(tǒng)體格檢查，并根據(jù)測(cè)試結(jié)果和醫(yī)生經(jīng)驗(yàn)對(duì)病人病情進(jìn)行判斷。神經(jīng)心理學(xué)測(cè)試采用簡(jiǎn)易精神量表(MMSE)、日常生活能力量表(ADL)、漢密爾頓抑郁量表進(jìn)行，對(duì)于AD的鑒別診斷參考海金斯缺血量表進(jìn)行。所有病人信息采集之后于當(dāng)天明確診斷，當(dāng)發(fā)生爭(zhēng)議時(shí)，由專家組對(duì)病人進(jìn)行再次隨訪，以明確診斷。癡呆的診斷依照DSM-4標(biāo)準(zhǔn)，AD以NINCDS-ADRDA標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行

6、診斷，血管性癡呆診斷標(biāo)準(zhǔn)依照NINDS-AIREN標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。其他類型癡呆因診斷標(biāo)準(zhǔn)太多，且發(fā)病率較低，本次研究暫未納入。
　　2.患病率分年齡、性別計(jì)算并依據(jù)2010年第六次全國(guó)人口普查數(shù)據(jù)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化，人口資料和危險(xiǎn)因素分析使用SAS16.0和spss20.0進(jìn)行分析，針對(duì)已采集到的數(shù)據(jù)進(jìn)行數(shù)據(jù)篩選剔除，采用卡方檢驗(yàn)獲得AD組和非AD組病人差異。針對(duì)有差異因素進(jìn)行病例對(duì)照實(shí)驗(yàn)分析危險(xiǎn)因素，根據(jù)病人長(zhǎng)居的調(diào)查地區(qū)，按照1∶10的比例

7、從原始數(shù)據(jù)中隨機(jī)篩選出未出現(xiàn)認(rèn)知損傷的健康人數(shù)據(jù)，進(jìn)行Logistic回歸獲得藏族AD患病非遺傳性危險(xiǎn)因素。由于血管性癡呆病人僅有8人，故而在后續(xù)數(shù)據(jù)分析中予以剔除。
　　3.基因多態(tài)性分析采用病例對(duì)照研究方法，通過(guò)現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查篩選和招募，按病例組年齡、性別進(jìn)行1∶1.5配比。共收集散發(fā)性AD患者外周血標(biāo)本39例、健康對(duì)照者外周血標(biāo)本56例，統(tǒng)計(jì)學(xué)檢測(cè)兩組性別年齡無(wú)差異，具有可比性。入組對(duì)象空腹8小時(shí)以上，抽取5ml外周靜脈血于EDT

8、A-K2抗凝管中，按照人血液DNA提取試劑盒操作步驟提取DNA，然后采用基質(zhì)輔助激光解吸附電離飛行時(shí)間質(zhì)譜分析技術(shù)(matrix-assisted laser desorption/ionization-time of flight，MALDI-TOF)進(jìn)行分型檢測(cè)。檢測(cè)位點(diǎn)通過(guò)查閱既往文獻(xiàn)及參閱全基因組關(guān)聯(lián)研究成果獲得，Hardy-Weinberg遺傳平衡、位點(diǎn)間連鎖不平衡性、單體型及基因多態(tài)性分析使用SHEsis軟件進(jìn)行。
　

9、　所有數(shù)據(jù)分析結(jié)果以P＜0.05認(rèn)定為存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　結(jié)果:
　　1.參與數(shù)據(jù)分析的共有3982名藏族60歲以上老人，參與率達(dá)到88.37％?；加邪V呆、血管性癡呆和AD的人數(shù)分別為61人、8人和53人。
　　2. 60歲以上藏族老年人癡呆患病率為1.53％(95％CI，1.15-1.92)，AD患病率為1.33％(95％CI，0.98-1.69)。其中AD女性患病率為1.59％(95％CI，1.10-2.09)，

10、男性患病率為0.92％(95％ CI，0.44-1.39)，女性高于男性。自60歲至85歲，按照每5年一個(gè)年齡段進(jìn)行分層，發(fā)現(xiàn)各年齡段中85歲以上年齡段患病率最高，癡呆和AD患病率均為12.05％(95％CI，7.10-17.00)。
　　3.剔除血管性癡呆病人后，針對(duì)AD病人進(jìn)行人口資料分析。發(fā)現(xiàn)年齡、婚姻狀況、出生地、生活伴侶、飲酒、抽煙、磕長(zhǎng)頭、念經(jīng)、撥念珠、轉(zhuǎn)經(jīng)桶，牛肉、羊肉、奶制品、豆制品、雞肉、魚肉及雞蛋的攝入習(xí)慣，慢

11、性阻塞性肺疾病病史及頭部外傷史，在患病組和非患病組之間均存在組間差異。接下來(lái)進(jìn)行病例對(duì)照研究分析危險(xiǎn)因素，單因素分析發(fā)現(xiàn)，年齡在75-79歲(OR，.4.497;95％CI,1.691-12.487)、80-84歲(OR,4.583;95％CI,1.427-14.719)、＞85歲(OR,38.500;95％CI,12.630-117.356)，牛肉(OR,2.162;95％CI,1.099-4.252)、羊肉(OR,2.464;95％

12、CI,1.165-5.211)及奶制品(OR,2.212;95％CI,1.075-4.549)攝入，慢性阻塞性肺疾病(OR,11.070;95％CI,1.805-67.874)及頭部外傷史(OR，14.510;95％CI,1.293-162.889)與AD患病呈正相關(guān);吸煙(OR,0.195;95％CI,0.046-0.824)、磕長(zhǎng)頭(OR,0.095;95％CI,0.029-0.309)、念經(jīng)(OR,0.279;95％CI,0.15

13、5-0.503)、撥念珠(OR,0.331;95％CI,0.184-0.595)、轉(zhuǎn)經(jīng)筒(OR,0.511;95％CI,0.275-0.951)、雞肉(OR,0.079;95％CI,0.011-0.580)及雞蛋(OR,0.231;95％CI,0.081-0.658)攝入習(xí)慣與AD患病呈負(fù)相關(guān)。針對(duì)單因素分析中獲得的患病關(guān)聯(lián)因素進(jìn)行多因素回歸分析發(fā)現(xiàn)，年齡在75-79歲(OR,4.497;95％CI,1.691-12.487)、80-8

14、4歲(OR,4.583;95％CI,1.427-14.719)、＞85歲(OR,35.728;95％ CI,9.640-132.418)，牛肉(OR，6.174;95％ CI,2.460-15.492)、頭部外傷史(OR，44.622;95％ CI,2.546-782.170)與AD患病呈正相關(guān);磕長(zhǎng)頭(OR，0.109;95％CI,0.027-0.439)、撥念珠(OR，0.198;95％CI,0.084-0.467)、雞肉(OR，0

15、.050;95％CI,0.005-0.520)攝入習(xí)慣與AD患病呈負(fù)相關(guān)。
　　4.病例對(duì)照研究進(jìn)行基因多態(tài)性分析。
　　(1)病例組和對(duì)照組經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析年齡性別無(wú)差異。
　　(2)rs11136000等13個(gè)位點(diǎn)的基因型在選取的研究對(duì)象中均符合Hardy-Weinberg遺傳平衡，說(shuō)明研究對(duì)象有良好的群體代表性。
　　(3)連鎖不平衡性分析表明CLU基因rs11136000和rs2279590位點(diǎn)可以相互替代，

16、不可進(jìn)行單體型分析。CLU基因rs2279590和rs9331888位點(diǎn)、rs11136000和rs9331888位點(diǎn)，TP53INP1基因rs1713669和rs4735333、rs896855位點(diǎn)，TFAM基因rs1937和rs2306604位點(diǎn)存在連鎖不平衡，可以進(jìn)行單體型分析。
　　結(jié)論:
　　1.60歲以上藏族老年人癡呆患病率為1.53％，AD患病率為1.33％。低于目前有過(guò)報(bào)道的國(guó)內(nèi)其他人群。
　　2.藏族