噬血細(xì)胞綜合征患兒外周血單核細(xì)胞Toll樣受體2、3、4表達(dá)水平的研究.pdf

1、目的：本研究通過分析噬血細(xì)胞綜合征患兒外周血單核細(xì)胞Toll樣受體2、3、4和下游信號(hào)傳導(dǎo)分子、效應(yīng)分子的表達(dá)改變，旨在進(jìn)一步研究噬血細(xì)胞綜合征發(fā)病機(jī)制，為其診斷、治療提供理論依據(jù)。
　　方法：采用流式細(xì)胞術(shù)對(duì)18例初發(fā)噬血細(xì)胞綜合征患兒及18例正常同齡健康兒童的外周血單核細(xì)胞TLR2、3、4蛋白表達(dá)水平進(jìn)行檢測(cè)，同時(shí)采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法對(duì)TLR傳導(dǎo)通路中MyD88、TRAF6、IRAK4、TRAM、TRIF、TBK1、IR

2、F3等信號(hào)分子mRNA表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)，比較兩組間差異;并運(yùn)用ELISA方法比較兩組間血漿中IL-1β，IFN-α，INF-β，TFN-α表達(dá)水平的差異。
　　結(jié)果：1）HLH組外周血單核細(xì)胞TLR2、3、4表達(dá)比例均明顯高于健康對(duì)照組（P均＜0.05）。2）TLR信號(hào)傳導(dǎo)通路中各信號(hào)分子mRNA檢測(cè)結(jié)果：HLH組MyD88、TRAF6、IRAK4、TRAM、TRIF、TBK1、IRF3較健康對(duì)照組升高。其中MyD88、TRAF6、I

3、RAK4三者mRNA表達(dá)較健康對(duì)照組升高，P均＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；TRIF、TBK1、IRF3的mRNA較正常對(duì)照組略有升高，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）；HLH組TRAM分子mRNA表達(dá)水平低于健康對(duì)照組，P＜0.05，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。3）HLH組血漿細(xì)胞因子IL-1β，IFN-γ及TNF-α水平較健康對(duì)照組明顯升高（P＜0.05），IFNF-α水平在HLH組雖較正常對(duì)照組有所增高但其差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（其P＞0.05）。<

4、br>　　結(jié)論：1）TLR2、3、4的大量表達(dá)，提示TLR2、3、4在HLH的發(fā)病過程中起重要作用。2) HLH的發(fā)生過程可能由于內(nèi)源性/外源性配體誘導(dǎo)TLR2/4-MyD88依賴性通路信號(hào)傳導(dǎo)及效應(yīng)分子IRAK4等大量活化，以及同時(shí)存在而在TRIF依賴性通路中TRAM，TRIF等分子的失活或表達(dá)受到抑制所致。3）HLH之所以存在“炎癥因子風(fēng)暴”可能正是因?yàn)镸yD88依賴信號(hào)通路的活化，炎性細(xì)胞因子高表達(dá)，同時(shí)TRIF信號(hào)通路異常，導(dǎo)致