聯(lián)合使用二甲雙胍與2-脫氧葡萄糖抑制小型豬多囊腎病進(jìn)展的研究.pdf

1、目的：常染色體顯性多囊腎病(ADPKD)是最常見遺傳性腎病，目前尚無有效的預(yù)防及治療藥物。已發(fā)現(xiàn)多囊腎細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞類似，主要依賴糖酵解產(chǎn)生ATP。2-Deoxy-D-glucose(2DG)是糖酵解阻斷劑，二甲雙胍是AMPK激活劑，目前兩者已用于腫瘤治療。小型豬與嚙齒類動(dòng)物相比，在代謝、生理等方面與人更加相似，是研究ADPKD機(jī)制的一種理想大動(dòng)物模型。本研究首次從能量代謝的角度入手，聯(lián)合使用抗代謝藥物二甲雙胍和2-脫氧葡萄糖長(zhǎng)期治療緩

2、慢進(jìn)展性ADPKD小型豬模型，觀察了兩種藥物單獨(dú)或者聯(lián)合對(duì)ADPKD小型豬的治療效果以及對(duì)腎臟組織能量代謝、細(xì)胞增殖的影響。
　　方法：(1)隨機(jī)挑選5-6月齡的通過鋅指核酶(ZFN)技術(shù)敲除PKD1基因的中國(guó)實(shí)驗(yàn)用小型豬作為多囊腎模型組(PKD)，選取相同月齡相同品系的野生型小型豬作為正常對(duì)照組(CON)。喂養(yǎng)20個(gè)月，按規(guī)定日期麻醉后取血、尿標(biāo)本，然后處死動(dòng)物，制備腎臟組織標(biāo)本。觀察血生化、尿蛋白、腎臟病理改變、細(xì)胞周期相關(guān)蛋

3、白、增殖、代謝的變化情況。(2)將PKD1基因敲除的小型豬，隨機(jī)分為對(duì)照組，二甲雙胍干預(yù)組，2DG干預(yù)組，二甲雙胍和2DG聯(lián)合干預(yù)組。第一批小型豬飼養(yǎng)10個(gè)月后，按規(guī)定日期麻醉后取血、尿標(biāo)本，然后處死動(dòng)物，制備腎臟組織標(biāo)本。為了觀察長(zhǎng)期療效，第二批小型豬飼養(yǎng)至20個(gè)月時(shí)，麻醉后通過局部手術(shù)的方式取部分腎組織，小型豬蘇醒后繼續(xù)飼養(yǎng)。觀察指標(biāo)同上。
　　結(jié)果：(1)、結(jié)果發(fā)現(xiàn)在ADPKD小型豬腎臟中糖酵解水平明顯升高。mTOR信號(hào)通路

4、和ERK信號(hào)通路明顯激活。(2)、治療10個(gè)月后處死部分動(dòng)物，腎臟外觀和剖面圖以及CT所測(cè)囊腫指數(shù)結(jié)果均顯示：各藥物干預(yù)組與對(duì)照組相比有明顯差異;其中聯(lián)合用藥組差異最顯著;但各組血、尿生化結(jié)果水平無明顯改變。治療20個(gè)月后，生化結(jié)果顯示，各用藥組與對(duì)照組相比血清肌酐及尿蛋白/尿肌酐比值明顯降低。為了長(zhǎng)期觀察治療效果，采用手術(shù)的方式取腎臟組織，結(jié)果顯示：與對(duì)照組相比，藥物干預(yù)組小型豬腎臟組織中增殖信號(hào)通路mTOR以及ERK的關(guān)鍵分子表達(dá)水