葛根素對AD及2型糖尿病模型大鼠腦內(nèi)Tau蛋白磷酸化水平的影響及部分機(jī)制的研究.pdf

1、目的：
　　隨著人口老齡化問題日益嚴(yán)重，阿爾茲海默病（AD）和2型糖尿?。═2DM）發(fā)病率急劇增加，為現(xiàn)代社會與家庭帶來極大困擾。AD與T2DM的防治目前已成為現(xiàn)代社會關(guān)注的焦點(diǎn)。AD的發(fā)病率隨年齡增加而明顯增高，研究發(fā)現(xiàn) T2DM是 AD的獨(dú)立重要危險因素之一。過度磷酸化 tau蛋白聚集形成的神經(jīng)原纖維纏結(jié)是AD病人腦內(nèi)特征性的病理改變之一?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，葛根素對T2DM大鼠的胰島β細(xì)胞具有保護(hù)作用，對大鼠海馬神經(jīng)元損傷也具

2、有明顯的保護(hù)作用，可以改善AD小鼠的認(rèn)知功能障礙等作用。本研究旨在觀察葛根素對 AD及 T2DM模型動物腦內(nèi) tau蛋白磷酸化水平的影響，探討其可能的作用機(jī)制，為臨床應(yīng)用葛根素防治AD及T2DM性認(rèn)知功能障礙提供理論基礎(chǔ)及實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：
　　1.通過連續(xù)腹腔注射D-半乳糖（160mg/kg/d）的方法復(fù)制AD模型大鼠，將SD雄性大鼠隨機(jī)分為3組：正常對照組（簡稱對照組）、AD模型組（簡稱模型組）、葛根素（80mg/k

3、g/d）治療組（簡稱Pue組），采用免疫印跡法檢測大鼠嗅球組織內(nèi) tau-1、PS396、和 tau-5的表達(dá)水平及GSK-3β的磷酸化水平。為進(jìn)一步明確不同劑量的葛根素對AD模型大鼠的影響是否存在差異，隨后將 SD大鼠分為 AD模型組、葛根素低劑量（40mg/kg/d）治療組，葛根素中劑量（80mg/kg/d）治療組及葛根素高劑量（160mg/kg/d）治療組,治療4周后取材，采用免疫印跡法檢測大鼠嗅球組織內(nèi)tau-1、PS396的表

4、達(dá)水平。
　　2.選用SD雄性大鼠，隨機(jī)分為造模組和正常對照組（簡稱正常組），造模組連續(xù)高脂高糖飼料喂養(yǎng)4周后通過一次性腹腔注射30mg/kg的鏈脲佐菌素（STZ）溶液制作T2DM大鼠模型。造模成功后將T2DM大鼠隨機(jī)分為T2DM模型組（簡稱模型組），葛根素（80mg/kg/d）治療組（簡稱Pue組），羅格列酮治療組（簡稱RSG組）。治療期間監(jiān)測各組大鼠的體重、血糖、攝食量、飲水量。治療4周后取材，采用HE染色法觀察大鼠胰島的組織

5、結(jié)構(gòu)，采用免疫印跡法對大鼠海馬組織內(nèi)tau-1、PS396、tau-5、OGA和OGT的表達(dá)水平進(jìn)行檢測，采用免疫組化檢測大鼠海馬內(nèi)tau-1及PS396在CA1區(qū)、CA3區(qū)及齒狀回（DG）區(qū)的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1.葛根素可明顯緩解AD模型大鼠嗅球內(nèi)tau蛋白磷酸化水平的增高。
　　2.不同劑量葛根素均可有效降低AD模型大鼠嗅球內(nèi)tau蛋白磷酸化水平的增高（P<0.01），但其作用并未呈現(xiàn)量效反應(yīng)。
　　3

6、.與正常對照組相比，AD模型大鼠嗅球內(nèi)GSK-3β活性水平明顯增高（P<0.01），葛根素可有效緩解AD模型大鼠嗅球內(nèi)GSK-3β活性水平增高（P<0.05）。
　　4.葛根素對T2DM模型大鼠體重的影響，與正常組比較，模型組的大鼠體重表現(xiàn)為負(fù)增長（P<0.01）；葛根素治療可有效增加T2DM大鼠的體重（P<0.01）。
　　5.葛根素可有效降低T2DM模型大鼠的空腹血糖(P<0.05）。
　　6.葛根素可有效改善T2

7、DM模型大鼠攝食量、飲水量的增加（P<0.01）。
　　7.與正常組相比，模型組大鼠的胰島組織結(jié)構(gòu)破壞明顯，其形態(tài)不規(guī)則、胰島面積及數(shù)量明顯減少，胰島內(nèi)細(xì)胞胞漿減少，部分細(xì)胞內(nèi)呈現(xiàn)空泡變性的現(xiàn)象；Pue給藥治療可明顯改善模型大鼠胰島組織結(jié)構(gòu)的破壞。
　　8.與正常組相比，模型組大鼠海馬內(nèi)Tau-5表達(dá)升高（P<0.01）；Tau-1表達(dá)降低（P<0.05）；葛根素治療未能有效改善T2DM模型大鼠海馬內(nèi)總tau蛋白及tau蛋白

8、磷酸化水平的增加。
　　9.與正常組相比，模型組大鼠海馬內(nèi)OGT水平降低（P<0.05），OGA變化無明顯差異；葛根素治療未能有效改善T2DM模型大鼠海馬內(nèi)糖基化水平的降低。
　　結(jié)論：
　　1.葛根素可有效減緩AD模型大鼠嗅球內(nèi)tau蛋白磷酸化水平的增加，其作用機(jī)制可能與其降低GSK-3β活性水平有關(guān)。
　　2.葛根素可以降低T2DM模型大鼠空腹血糖，增加大鼠體重，降低大鼠攝食量、飲水量。
　　3.葛根素