具核梭桿菌感染與FANCD2在結(jié)直腸癌中的相關(guān)性研究.pdf

1、研究背景與目的：
　　結(jié)直腸癌（Colorectalcancer，CRC）為人類最常見的胃腸道惡性腫瘤之一，其發(fā)病機(jī)制尚不明確。具核梭桿菌（Fusobacteriumnucleatum，F(xiàn)n）是一種革蘭氏陰性厭氧桿菌，多見于口腔疾病如牙周炎，近年來(lái)有研究發(fā)現(xiàn)其與結(jié)直腸癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān)，但具體的致癌機(jī)制仍未清楚。范科尼貧血（Fanconianemia，F(xiàn)A）是以FA通路失活導(dǎo)致DNA損傷修復(fù)功能障礙為分子基礎(chǔ)的血液疾病，有明顯的腫瘤

2、易感性，研究證實(shí)部分非FA來(lái)源的散發(fā)腫瘤的發(fā)生與FA通路失活有關(guān)；范科尼貧血互補(bǔ)群基因D2（FanconianemiacomplementationgroupD2，F(xiàn)ANCD2）是FA通路的關(guān)鍵基因，已有研究發(fā)現(xiàn)其在結(jié)直腸癌中表達(dá)異常。本文主要研究結(jié)直腸癌中具核梭桿菌感染與FANCD2表達(dá)之間的相關(guān)性，探討具核梭桿菌是否有可能通過(guò)FA通路失活機(jī)制導(dǎo)致結(jié)直腸癌的發(fā)生。同時(shí)，經(jīng)研究證實(shí)消化道惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移與促炎癥細(xì)胞因子的作用關(guān)

3、系密切，為此我們還研究了結(jié)直腸癌組織中腫瘤壞死因子-a（Tumornecrosisfactor-a，TNF-a）、白細(xì)胞介素-6（Interleukin-6，IL-6）的表達(dá)與具核梭桿菌之間的相關(guān)性。
　　方法：
　　采用RT-PCR方法檢測(cè)40例結(jié)直腸癌組織及其配對(duì)正常組織中具核梭桿菌的豐度、FANCD2mRNA的表達(dá)，分別分析具核梭桿菌、FANCD2mRNA表達(dá)與結(jié)直腸癌患者臨床病理特征的關(guān)系，并進(jìn)一步分析具核梭桿菌感染

4、與FANCD2表達(dá)兩者之間的相關(guān)性。隨機(jī)選取其中21例結(jié)直腸癌組織及其配對(duì)組織，同樣采用RT-PCR方法檢測(cè)具核梭桿菌的豐度和促炎性細(xì)胞因子（TNF-a、IL-6）表達(dá)，并分析具核梭桿菌與兩者之間的相關(guān)性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果均采用SPSS20.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理及分析，檢驗(yàn)水準(zhǔn)a=0.05，P＜0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1、結(jié)直腸癌組織及其配對(duì)正常組織中均可檢測(cè)出具核梭桿菌，癌組織中具核梭桿菌的相對(duì)豐度較配對(duì)正常組織

5、升高的例數(shù)占67.5％（27/40），兩者分別為0.054916（0.004354,1.87703）、0.027057（0.002264,0.338817），癌組織的具核梭桿含量較配對(duì)正常組織升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.022）。結(jié)直腸癌中具核梭桿菌相對(duì)豐度與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)（P=0.048），但與性別、年齡、腫瘤部位、分化程度、浸潤(rùn)深度及Dukes分期無(wú)明顯關(guān)系（P>0.05）。
　　2、結(jié)直腸癌組織及其配對(duì)組織中均有FANC

6、D2mRNA表達(dá)，結(jié)直腸癌組織FANCD2mRNA比配對(duì)正常組織升高的例數(shù)占患者總例數(shù)的70.0%（28/40），癌組織的FANCD2mRNA相對(duì)表達(dá)量較配對(duì)正常組織升高，分別為0.016629（0.007040,0.042966）、0.005518（0.001347,0.012658），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.002），其表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)（P=0.023），但與性別、年齡、腫瘤部位、分化程度、浸潤(rùn)深度及Dukes分期未見明顯相關(guān)

7、（P>0.05）。
　　3、結(jié)直腸癌中具核梭桿菌的感染與FANCD2表達(dá)升高之間無(wú)明顯相關(guān)性（rSpearman=0.091，P=0.578）。
　　4、結(jié)直腸癌組織及其配對(duì)組織中均可檢測(cè)出促炎癥細(xì)胞因子TNF-a、IL-6，癌組織中TNF-amRNA相對(duì)表達(dá)量較配對(duì)正常組織升高，分別為0.002893（0.001509,0.009993）、0.002291（0.000752,0.005196），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.

8、011）。癌組織的IL-6mRNA相對(duì)表達(dá)量較配對(duì)正常組織升高，分別為0.005627（0.003652,0.025999）、0.003952（0.001904,0.015148），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.048）。
　　5、結(jié)直腸癌中具核梭桿菌感染與促炎癥細(xì)胞因子TNF-a呈正相關(guān)關(guān)系，且其相關(guān)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（rSpearman=0.436，P=0.048）；與IL-6之間呈弱正相關(guān)性，未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（rSpearman=0