鋁致LTP損傷過程中NL1和谷氨酸受體的蛋白間相互作用研究.pdf

1、目的：
　　觀察亞慢性鋁暴露可能通過改變NL1與NX、NR1、NR2A、NR2B和mGluR1蛋白間相互作用導(dǎo)致LTP改變，完善鋁致LTP改變的生物學(xué)機(jī)制。
　　方法：
　　動物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究：（1）180只雄性SD大鼠，分別染毒1、2、3個月，共計(jì)3批，每一批60只，按體重隨機(jī)分為空白對照組、生理鹽水對照組和1.62mg/kg Al(mal)3組、0.81mg/kg Al(mal)3組、0.41mg/kg Al(mal

2、)3組3個麥芽酚鋁暴露組，每個劑量組12只，除空白對照組大鼠外隔天經(jīng)腹腔注射建立鋁染毒亞慢性模型；（2）電生理學(xué)方法檢測大鼠海馬CA1區(qū)在體海馬LTP幅值；（3）石墨爐原子吸收法測定大鼠海馬腦鋁水平；（4）免疫共沉淀法和Western-blot法測定與NL1結(jié)合的NX、NR1、NR2A、NR2B、mGluR1蛋白表達(dá)量。
　　結(jié)果：
　　1、大鼠海馬腦鋁結(jié)果：對大鼠腦鋁水平進(jìn)行鋁暴露時間與劑量的析因方差分析，結(jié)果顯示與鋁暴露

3、1個月組相比，2個月和3個月組腦鋁內(nèi)暴露水平明顯上升(P<0.05)，與空白對照組和生理鹽水對照組相比，0.41mg/kg組、0.81mg/kg組和1.62mg/kg組腦鋁水平均明顯升高(P<0.05)，1.62mg/kg組腦鋁水平與0.41mg/kg組和0.81mg/kg組相比均顯著增加(P<0.05)。
　　2、鋁暴露對大鼠海馬在體LTP的影響：（1）LTP結(jié)果在鋁暴露時間與劑量的析因方差分析結(jié)果：結(jié)果顯示與空白對照組相比，生

4、理鹽水對照組、0.41mg/kg組、0.81mg/kg組和1.62mg/kg組LTP均明顯降低(P<0.05)，1.62mg/kg組 LTP幅值與0.41mg/kg組、0.81mg/kg組及生理鹽水對照組相比均顯著下降(P<0.05)。（2）各個鋁暴露時間組LTP多因素重復(fù)測量方差分析結(jié)果：對鋁暴露1個月組、2個月組和3個月組LTP在各暴露組結(jié)果分別進(jìn)行多因素重復(fù)測量方差分析，結(jié)果顯示與空白對照組相比，生理鹽水對照組、0.81mg/kg

5、組和1.62mg/kg組LTP在3個鋁暴露時間組均明顯降低(P<0.05)。
　　3、大鼠海馬中NL1蛋白表達(dá)量測定：對大鼠海馬中NL1蛋白表達(dá)量進(jìn)行鋁暴露時間與劑量的析因方差分析，結(jié)果顯示與空白對照組和生理鹽水對照組相比，0.41mg/kg、0.81mg/kg和1.62mg/kg組NL1蛋白表達(dá)量均明顯降低(P<0.05)，但是1.62mg/kg、0.81mg/kg和0.41mg/kg組間兩兩比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差別（P>0.05）。

6、
　　4、與NL1抗體結(jié)合的NX蛋白表達(dá)量測定：對與NL1抗體結(jié)合的NX蛋白表達(dá)量進(jìn)行鋁暴露時間與劑量的析因方差分析，結(jié)果顯示與鋁暴露1個月組相比，2個月和3個月組NX蛋白結(jié)合量均明顯減少(P<0.05)；與空白對照組和生理鹽水對照組相比，0.41mg/kg、0.81mg/kg和1.62mg/kg組NX蛋白結(jié)合量均明顯降低(P<0.05)，1.62mg/kg組NX蛋白結(jié)合量與0.41mg/kg組相比顯著下降(P<0.05)。

7、>　　5、與NL1抗體結(jié)合的谷氨酸受體表達(dá)量測定：
　　(1) NR1蛋白結(jié)合量測定：對與NL1抗體結(jié)合的NR1蛋白表達(dá)量進(jìn)行鋁暴露時間與劑量的析因方差分析，結(jié)果顯示與鋁暴露1個月組相比，2個月組和3個月組NR1蛋白結(jié)合量均明顯減少(P<0.05)；與空白對照組和生理鹽水對照組相比，0.41mg/kg、0.81mg/kg和1.62mg/kg組NR1蛋白結(jié)合量均明顯降低(P<0.05)，1.62mg/kg組NR1蛋白結(jié)合量與0.41

8、mg/kg和0.81mg/kg組相比顯著下降(P<0.05)。
　　(2) NR2A蛋白結(jié)合量測定：對與NL1抗體結(jié)合的NR2A蛋白表達(dá)量進(jìn)行鋁暴露時間與劑量的析因方差分析，結(jié)果顯示與鋁暴露1個月組相比，2個月和3個月組NR2A蛋白結(jié)合量均明顯減少(P<0.05)；與空白對照組和生理鹽水對照組相比，0.41mg/kg、0.81mg/kg和1.62mg/kg組 NR2A蛋白結(jié)合量均明顯降低(P<0.05)，1.62mg/kg組NR2

9、A蛋白結(jié)合量與0.41mg/kg和0.81mg/kg組相比顯著下降(P<0.05)。
　　(3) NR2B蛋白結(jié)合量測定：對與NL1抗體結(jié)合的NR2B蛋白表達(dá)量進(jìn)行鋁暴露時間與劑量的析因方差分析，結(jié)果顯示與鋁暴露1個月組相比，2個月組和3個月組NR2B蛋白結(jié)合量均明顯減少(P<0.05)；與空白對照組和生理鹽水對照組相比，0.41mg/kg、0.81mg/kg和1.62mg/kg組 NR2B蛋白結(jié)合量均明顯降低(P<0.05)，1

10、.62mg/kg組NR2B蛋白結(jié)合量與0.41mg/kg和0.81mg/kg組相比顯著下降(P<0.05)。
　　(4) mGluR1蛋白結(jié)合量測定：對與NL1抗體結(jié)合的mGluR1蛋白表達(dá)量進(jìn)行鋁暴露時間與劑量的析因方差分析，結(jié)果顯示與鋁暴露1個月組相比，3個月組mGluR1蛋白結(jié)合量明顯減少(P<0.05)；與空白對照組和生理鹽水對照組相比，0.41mg/kg、0.81mg/kg和1.62mg/kg組mGluR1蛋白結(jié)合量均明

11、顯降低(P<0.05)，1.62mg/kg組mGluR1蛋白結(jié)合量與0.41mg/kg和0.81mg/kg組相比顯著下降(P<0.05)。
　　結(jié)論：
　　1、亞慢性腹腔注射鋁暴露使大鼠海馬CA1區(qū)在體LTP降低，且LTP幅值隨著鋁暴露時間延長和劑量增大而降低。
　　2、鋁暴露大鼠海馬中與NL1結(jié)合的NX減少，提示鋁可能通過破壞兩者正常連接而影響NL1正常生物學(xué)功能。
　　3、鋁暴露大鼠海馬中與NL1結(jié)合的NMD