Ⅱ型代謝性谷氨酸受體在內(nèi)毒素所致急性肺損傷發(fā)生中的作用.pdf

1、Ⅱ型促代謝型谷氨酸受體(Ⅱ mGluRs)是G蛋白偶聯(lián)受體,包括mGluR2和mGluR3兩亞型.在神經(jīng)系統(tǒng)中,Ⅱ mGluRs作為突觸前自身受體,對(duì)谷氨酸的釋放發(fā)揮負(fù)反饋調(diào)節(jié)。實(shí)驗(yàn)表明,ⅡmGluRs的激活可通過(guò)促進(jìn)谷氨酸的吸收來(lái)減輕內(nèi)毒素誘導(dǎo)的神經(jīng)毒性。但ⅡmGluRs的激活對(duì)LPS誘導(dǎo)的急性肺損傷有何影響未見(jiàn)報(bào)道。為進(jìn)一步全面揭示內(nèi)毒素(LPS)對(duì)肺臟影響的機(jī)制,本文首次觀察小鼠肺組織的Ⅱ mGluRs的表達(dá)和分布,LPS急性肺損

2、傷時(shí)肺內(nèi)是否存在Glu的釋放,以及Glu的受體Ⅱ mGluPs活化,如何影響LPS肺損傷的發(fā)生發(fā)展。
　　 目的:觀察肺組織細(xì)胞上是否存在ⅡmGluRs的分布,觀察LPS誘導(dǎo)急性肺損傷時(shí)肺內(nèi)是否存在谷氨酸(Glu)的釋放,觀察ⅡmGluRs阻斷劑LY341495對(duì)內(nèi)毒素所致小鼠肺損傷的影響,進(jìn)一步探討內(nèi)毒素誘導(dǎo)急性肺損傷的機(jī)制。
　　 方法:運(yùn)用免疫組化法、免疫熒光法和熒光定量RT-PCR技術(shù)檢測(cè)肺組織上Ⅱ mGluRs

3、(mGluR2/3)和mRNA的表達(dá);腹腔注射內(nèi)毒素誘導(dǎo)小鼠肺損傷,用高效液相色譜法測(cè)量支氣管肺泡灌洗液中氨基酸的濃度。稱重測(cè)定肺濕重/干重比值、生化測(cè)定肺組織勻漿髓過(guò)氧化物酶(MPO)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量;常規(guī)組織切片觀察肺組織病理改變。
　　 結(jié)果:
　　 1.小鼠肺組織的Ⅱ mGluRs的表達(dá)。正常小鼠肺組織免疫組化和免疫熒光結(jié)果均顯示肺組織上有

4、mGluR2/3的表達(dá);熒光定量RT-PCR結(jié)果顯示,正常肺組織有mGluR2/3的mRNA表達(dá),LPS處理組(10mg/kg)mGluR3的mRNA表達(dá)減少。
　　 2.內(nèi)毒素誘導(dǎo)急性肺損傷。小鼠支氣管肺泡灌洗液中谷氨酸含量變化與生理鹽水對(duì)照組相比,LPS處理組(10mg/kg)支氣管肺泡灌洗液中Glu的濃度增高;蘇氨酸、蛋氨酸及精氨酸的濃度降低,其它氨基酸濃度無(wú)顯著性變化。
　　 3.ⅡmGluRs阻斷劑LY3414

5、95對(duì)內(nèi)毒素誘導(dǎo)。小鼠肺損傷的保護(hù)作用于給予LPS前20min腹腔注射LY341495(1mg/kg)預(yù)處理,（1）顯著降低LPS引起的肺濕/干重比升高;（2）抑制LPS引起的肺組織勻漿髓過(guò)氧化物酶(MPO)活力、一氧化氮(NO)含量、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)活力和丙二醛(MDA)含量均增高;逆轉(zhuǎn)LPS引起的肺組織SOD水平降低的效應(yīng)；（3）顯著降低LPS引起的肺組織炎癥反應(yīng)。
　　 結(jié)論:
　　 1.肺組織細(xì)胞有