水稻高效受體系統(tǒng)的建立及兩種遺傳轉(zhuǎn)化方法的研究.pdf

1、吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文水稻高效受體系統(tǒng)的建立及兩種遺傳轉(zhuǎn)化方法的研究姓名：郝文媛申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：作物遺傳育種指導(dǎo)教師：王丕武20030601吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文 水稻高致受體系統(tǒng)的建立及兩種遺傳轉(zhuǎn)化方法的研究轉(zhuǎn)化效率降低，分別為9 7 ．1 4 ％，8 5 ．2 9 ％、2 7 ．0 3 ％。當(dāng)距離為6 c m 時(shí)，槍基后細(xì)胞受損嚴(yán)重，褐化較多，因此9c m 轟擊距離較為適宜。2 ．在轟擊距離為9 c m 的條件下，轟擊1

2、 、2 、3 次，轉(zhuǎn)化效率分別為8 5 ．2 9 ％，9 1 ．8 9 ％和9 6 ．4 3 ％，所以轟擊2 次最佳。四，根據(jù)農(nóng)桿菌侵染后愈傷組織的生長(zhǎng)狀態(tài)和褐化率優(yōu)化了農(nóng)桿菌介導(dǎo)法的遺傳轉(zhuǎn)化條件。l ，在農(nóng)桿菌液濃度為O D 6 。。；O ．6 4 6 4 的條件下，侵染時(shí)間為2 0 分鐘較為適宜，共培養(yǎng)3 天后茵斑數(shù)為9 6 ．9 7 ％。2 ．不同品種( 基因型) 的水稻愈傷組織對(duì)農(nóng)桿菌的敏感性不同，其中農(nóng)大3號(hào)、豐優(yōu)5 0 1

3、對(duì)L B A 4 4 0 4 較為敏感，侵染后褐化率較高為7 6 ．4 7 ％和6 6 ．4 7 ' ／, 。3 ．浸染后進(jìn)行過渡培養(yǎng)，即先進(jìn)行抑菌，不加入選擇劑，7 天后再進(jìn)行選擇，可以降低褐化率5 0 ％。五、獲得了轉(zhuǎn)B t 基因的轉(zhuǎn)基因水稻植株應(yīng)用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將B t 基因?qū)氲剿酒贩N豐優(yōu)5 0 1 中，共獲得轉(zhuǎn)化的植株3 4 株，其中1 l 株經(jīng)P C R 檢測(cè)呈陽(yáng)性，并獲得了可育的轉(zhuǎn)基因植株3 株，1 9 5粒轉(zhuǎn)化的