小鼠抗人CD22單克隆抗體HIB22的生物學(xué)功能研究及其單鏈抗體的構(gòu)建.pdf

1、北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院碩士學(xué)位論文小鼠抗人CD22單克隆抗體HIB22的生物學(xué)功能研究及其單鏈抗體的構(gòu)建姓名：沈智聰申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：免疫學(xué)（科研型）指導(dǎo)教師：廖曉龍20090501北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院碩士研究生學(xué)位論文B i o l o g i c a lf u n c t i o nr e s e a r c h o f a m o u s e a n t ih u m a nC D 2 2 m o n o c

2、 l o n a l a n t i b o d y H I B 2 2 a n d d e v e l o p m e n to fs i n g l ec h a i nF v d e r i v e df r o m H I B 2 2 h y b r i d o m aA b s t r a c tC D 2 2i s a n i n h i b i t o r yc o r e c e p t o r o ft h e B -

3、 c e l l r e c e p t o r ( B C R ) ，a n di s r e q u i r e d t om o d u l a t e t h ea n t i g e n r e c e p t o r s i g n a li nr e s p o n s e t oc u e s f r o mt h el o c a l m i c r o e n v i r o n m e n t ．C D 2 2 s

4、 e l e c t i v e l ye x p r e s s e s o n t h es u r f a c eo f n o r m a la n d m a l i g n a n tm a t u r eB c e l l s ，a n dC a l lb et e s t e de x p r e s s i n go n m o r e t h a n 8 5 ％B - c e l l N H L ( n o n —H

5、 o d g k i n ’Sl y m p h o m a ) ．T h el i g a t i o no f n a t u r a ll i g a n do ra n t i b o d yw i m C D 2 2e x p r e s s e do nm a t u r eo rm a l i g n a n tBc e l l s c a nt r i g g e r ar a p i d i n t e m a l i

6、 z a t i o n o ft h e C D 2 2 ·l i g a n d c o m p l e x ．A l s o ，C D 2 2e x p r e s s e ss t a b l y o nm a l i g n a n c i e s ，a n dd o e sn o t h a v ea n y c h a n g e i nr e s p o n s et o t h em i c r o e n

7、v i r o n m e n t ．A l lt h e s ea d v a n t a g e s e n d o w C D 2 2 a ne x c e l l e n t t a r g e tf o rt h et h e r a p yo f N H L a n d a u t o i m m u n i t yd i s e a s e s ．R e s e a r c h a b o u tC D 2 2 一t a

8、r g e t e d t h e r a p y i sm a i n l y f o c u so n t h ed e v e l o p m e n t o f a n t i ·．C D 2 2m o n o c l o n a la n t i b o d i e sa n dd r u g sd e r i v e df r o mt h e s ea n t i b o d i e s ，w h i l eE

9、p r a t u z u m a bi so n e o f t h em o s t w i d e l y u s e da n t i - C D 2 2 a n t i b o d i e s i nc l i n i c a lr e s e a r c h ．H I B 2 2i sa m o u s ea n t i h u m a nC D 2 2m o n o c l o n a la n t i b o d yt

10、h a tw a sd e v e l o p e di n D e p t ．o fI m m u n o l o g y ,I n s t i t u t e o fH e m a t o l o g y , C h i n e s eA c a d e m yo fM e d i c a lS c i e n c e s ，a n dh a sad i f f e r e n tr e c o g n i z i n g e p

11、i t o p e f r o m E p r a m m n n a b ．C D 2 2 C a n r e g u l a t e B c e l l s t h r o u g hI i g a n d - d e p e n d e n t o r - i n d e p e n d e n t m e c h a n i s m s ，S Ot h eu s e o fd i f f e r e n t m o n o c

12、l o n a la n t i b o d i e sC a n r e s u l ti na s e r i e so f c l i n i c a le f f i c a c y ．I nt h i sr e s e a r c h ，F(xiàn) A C S ，M T T t e s t i n g , R T - P C R a n d c o n _ f o c a lm i c r o s c o p y w a s u s

13、e d f o rt h ei n v i t r o b i o l o g i c a l f u n c t i o n r e s e a r c h o fH I B 2 2 ：t h ee f f e c t o nt h ep r o l i f e r a t i o n a n da p o p t o s i so fN H L r e l e v a n tc e l ll i n eD a u d ia n d

14、R a j iw a s i n v e s t i g a t e d ；t h ei m p a c to nt h ec l o n ef o r m a t i o n a n d C D 2 5 e x p r e s s i o no f P W M s t i m u l a t e dP B M C f r o m h e a l t hd o n o r w a si n v e s t i g a t e d ；a

15、n d t h e i n t e r n a l i z a t i o n o f H I B 2 2 一C D 2 2 c o m p l e x W a s o b s e r v e d ．A na n t i - C D 2 2s i n g l ec h a i nF v w a sa l s od e v e l o p e df r o mH I B 2 2 h y b r i d o m a ：D N Ae n c

16、o d i n gv a r i a b l el i g h ta n d h e a v yc h a i nW a ss y n t h e s i z e du s i n gR T - P C R f r o mH I B 2 2 h y b r i d o m ar e s p e c t i v e l y ；t h ef u s i o ng e n ee n c o d i n gH I B 2 2 ·s c