VEGF-C、VEGFR-3在腎細(xì)胞癌中的表達(dá)及其與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)性的研究.pdf

1、目的:
　　探討血管內(nèi)皮生長因子-C(VEGF-C)及其受體(VEGFR-3)在腎細(xì)胞癌中的表達(dá)水平及其與淋巴管密度(LVD)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移之間的關(guān)系。進(jìn)一步闡明腎癌淋巴管生成的機(jī)制及其與腎癌生物學(xué)行為的關(guān)系,為腎癌的靶向治療提供新的靶點(diǎn)。
　　方法:
　　收集2012年7月至2013年9月承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院腎細(xì)胞癌(RCC)手術(shù)切除標(biāo)本40例,均為單發(fā),術(shù)前常規(guī)行泌尿系統(tǒng)超聲、CT或MRI檢查,其中18例行保留腎單位手

2、術(shù),22例行根治性腎切除術(shù),伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者均行根治性腎切除術(shù)加區(qū)域淋巴結(jié)清掃術(shù)?；颊咧心?5例,女15例。年齡24～65歲,平均年齡51.9歲。標(biāo)本均經(jīng)病理證實(shí)為RCC,其中透明細(xì)胞癌37例,乳頭狀腺癌2例,嫌色細(xì)胞癌1例,術(shù)前均未接受放療、化療及免疫治療。選取距腫瘤邊緣5cm以上的正常腎組織10例作為對照。標(biāo)本離體后分為2份,1份-80℃低溫冰箱保存;l份以4％多聚甲醛固定,常規(guī)石蠟包埋,備用。腫瘤分級按1997年WHO標(biāo)準(zhǔn):高

3、分化20例,中分化11例,低分化或未分化9例。腫瘤分期按2002年AJCC腎癌臨床分期:Ⅰ期22例,Ⅱ期6例,Ⅲ期11例,Ⅳ期1例。其中無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者29例,有腎門周圍淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者11例。冰凍組織采用RT-PCR方法研究40例腎細(xì)胞癌和10例正常腎組織中VEGF-C mRNA表達(dá)情況及其與腎細(xì)胞癌淋巴管密度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系。包埋蠟塊采用免疫組化方法檢測VEGF-C在腎癌及正常腎組織中的表達(dá)情況,VEGFR-3免疫組化染色研究腫瘤組織內(nèi)

4、和腫瘤周圍淋巴管的形態(tài)結(jié)構(gòu),并計(jì)數(shù)淋巴管密度(LVD);應(yīng)用 SPSS-17.0統(tǒng)計(jì)軟件,組間比較采用t檢驗(yàn)、卡方檢驗(yàn),等級資料采用秩和檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果:
　　1.VEGF-C mRNA表達(dá)情況經(jīng)半定量RT-PCR分析,10例正常腎組織中VEGF-C mRNA均可見少量表達(dá),相對表達(dá)水平為0.250±0.104。40例RCC組織VEGF-C mRNA相對表達(dá)水平為0.576±0.191,2組比

5、較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組和無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組VEGF-C mRNA相對表達(dá)水平分別為0.693±0.174和0.532±0.181,有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組較無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組明顯升高(P<0.05)。VEGF-C mRNA相對表達(dá)水平與年齡、性別、病理分級無關(guān),與臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)(P<0.05)。
　　2.VEGF-C在正常腎組織及RCC中的表達(dá)
　　腎癌組織內(nèi)VEGF-C陽性表達(dá)率(85.0%)顯著

6、高于正常腎組織(30.0%,p<0.01);高中分化組和低分化組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05),有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中VEGF-C表達(dá)顯著高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組(p<0.05),且VEGF-C陽性表達(dá)與腎癌臨床分期有關(guān)(p<0.05)。
　　3.RCC組織內(nèi)與腫瘤周圍組織LVD及其與腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系
　　免疫組化結(jié)果顯示陽性 VEGFR-3蛋白染色主要位于淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞胞質(zhì)和(或)胞膜,呈棕黃色。可見腫瘤內(nèi)淋巴管管腔較小,腫

7、瘤周圍淋巴管呈功能性擴(kuò)張,管徑明顯擴(kuò)大。同時部分微毛細(xì)血管(管腔內(nèi)可見紅細(xì)胞)、腎小管內(nèi)皮細(xì)胞可見棕黃染色,提示VEGFR-3不僅表達(dá)于淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞,還部分表達(dá)于微毛細(xì)血管及腎小管內(nèi)皮細(xì)胞。腫瘤周圍 LVD為14.16±2.58,高于腫瘤內(nèi)的9.74±2.48和正常腎組織10.27±2.92,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。腫瘤內(nèi)LVD與正常腎組織LVD之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的11例RCC瘤體內(nèi)、腫瘤周圍LVD分別為1

8、2.01±2.14和15.24±1.86,明顯高于29例無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的8.88±2.03和13.37±2.03,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
　　結(jié)論:
　　腎癌組織中VEGF-C mRNA表達(dá)明顯高于正常腎組織,有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組較無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組VEGF-C mRNA表達(dá)量升高,Ⅲ、Ⅳ期腎癌較Ⅰ、Ⅱ期腎癌VEGF-C mRNA表達(dá)量升高。腎癌組織內(nèi)VEGF-C表達(dá)陽性率顯著高于正常腎組織,有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中 VEGF-C