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文檔簡介
1、正常妊娠的建立和維持有賴于胚胎滋養(yǎng)細(xì)胞具有適度的侵襲力。在妊娠過程中,胚胎滋養(yǎng)層細(xì)胞侵入到母體蛻膜,并侵入其中的螺旋動脈,替代血管內(nèi)皮細(xì)胞,得以重鑄子宮螺旋動脈,建立母體/胎兒的交互式循環(huán),為胚胎的發(fā)育提供營養(yǎng)。滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤能力下降、侵入失敗導(dǎo)致子宮螺旋動脈重鑄障礙,是子癇前期發(fā)生重要的病理生理機(jī)制。
microRNA是一類長度為l9-25個(gè)nt的非編碼小分子RNA,它主要通過與靶標(biāo)基因3’UTR的完全或不完全配對,降解靶標(biāo)基
2、因mRNA或抑制其翻譯,從而參與調(diào)控個(gè)體發(fā)育、細(xì)胞凋亡、增殖及分化等生命活動[-]12。目前研究表明,位于HOXD基因家族簇中的miR-10b,與細(xì)胞的轉(zhuǎn)移、侵襲顯著相關(guān)[-]34,在胚胎發(fā)育過程中,滋養(yǎng)層細(xì)胞侵入子宮肌層過淺是導(dǎo)致子癇前期的重要原因之一。
我們前期研究發(fā)現(xiàn),miR-10b在子癇前期呈病理性低表達(dá),推測miR-10b的表達(dá)失衡可能參與了子癇前期的病理生理過程[]5。本研究采用瞬時(shí)轉(zhuǎn)染技術(shù)和Transwellch
3、amber實(shí)驗(yàn)對miRNA-10b的表達(dá)水平與體外滋養(yǎng)細(xì)胞侵襲能力相關(guān)性進(jìn)行研究,探討miRNA-10b在滋養(yǎng)細(xì)胞疾病中的作用。
目的:
研究人微小RNA-10b(microRNA-10b,miR-10b)對滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤細(xì)胞系JEG-3細(xì)胞侵襲力的影響。
方法:
通過化學(xué)方法合成成熟型人miR-10b,以脂質(zhì)體包裹miR-10b并轉(zhuǎn)染JEG-3細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)組,無關(guān)序列轉(zhuǎn)染組及空白轉(zhuǎn)染組分別為陰性對照
4、組與空白對照組;RT-PCR檢測各組miR-10b的表達(dá)。應(yīng)用Transwellchamber法檢測各組細(xì)胞侵襲能力的差別。
結(jié)果:
RT-PCR結(jié)果提示實(shí)驗(yàn)組miR-10b的表達(dá)量與無關(guān)序列組和空白對照組相比明顯升高,具有顯著性差異,(P<0.05)。Transwellchamber法檢測實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞的侵襲率與無關(guān)序列組、空白對照組相比均有顯著性升高。(P<0.05),無關(guān)序列組與空白對照組的侵襲率無顯著性差異(P>
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