細(xì)胞因子對人早孕滋養(yǎng)層細(xì)胞與卵巢癌細(xì)胞系HO-8910侵襲性影響的比較研究.pdf

1、第一軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文細(xì)胞因子對人早孕滋養(yǎng)層細(xì)胞與卵巢癌細(xì)胞系HO8910侵襲性影響的比較研究姓名：陳慧申請學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師：邢福祺陳士嶺20040501細(xì)胞因子對人早孕滋養(yǎng)層細(xì)胞與卵巢癌細(xì)胞系HO8910侵襲性影響的比較研究中文摘要目的在體外培養(yǎng)原代人早孕滋養(yǎng)層細(xì)胞及卵巢癌細(xì)胞系HO一8910細(xì)胞的基礎(chǔ)上，觀察4種外源性細(xì)胞因子對人早孕滋養(yǎng)層細(xì)胞及HO一8910細(xì)胞的效應(yīng)，比較細(xì)胞因子對兩種細(xì)胞在基因表達(dá)水平、蛋

2、白表達(dá)水平以及細(xì)胞水平侵襲能力的影響。方法早孕絨毛組織取自(6～8周)自愿人工流產(chǎn)的健康早孕婦女，由南方醫(yī)院婦產(chǎn)科提供。采用絨毛組織貼塊培養(yǎng)法進(jìn)行原代早孕滋養(yǎng)層細(xì)胞的培養(yǎng)，并鑒定和純化原代早孕滋養(yǎng)層細(xì)胞。培養(yǎng)卵巢癌細(xì)胞系HO8910細(xì)胞。分別以EGF、TNF一Ⅱ、IL1d、IL10刺激培養(yǎng)細(xì)胞48小時(shí)，用RTPCR檢測各侵襲相關(guān)基因MMP一2、MMP9、MTAl、KAllmRNA的表達(dá)，細(xì)胞ELISA法檢測蛋白MMP一2和CD44v6的

3、表達(dá)，利用Matrigel膜侵入培養(yǎng)系統(tǒng)，采用染色和顯微鏡下細(xì)胞計(jì)數(shù)的方法，對穿透Matrigel膜的細(xì)胞進(jìn)行定量分析，記錄各項(xiàng)檢測指標(biāo)的數(shù)據(jù)，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，比較兩種細(xì)胞在體外侵襲性的異同。結(jié)果：1體外觀察到人早孕滋養(yǎng)層細(xì)胞表達(dá)MTAl和KAllmRNA，以及CD44v6。2EGF促進(jìn)兩種細(xì)胞MMP2、MMP一9mRNA的表達(dá)，并呈濃度依賴性；TNF—d顯著提高兩種細(xì)胞MMP一2mRNA的表達(dá)，僅對細(xì)胞系HO8910細(xì)胞的MMP9mRN