青天葵黃酮類物質(zhì)的研究.pdf

1、 目的：以干燥青天葵大葉為研究對象,在前人的研究基礎(chǔ)上,篩選青天葵總黃酮的提取和純化方法,并進行含量測定；同時研究青天葵總黃酮的體外抗氧化活性,旨在為青天葵黃酮類化合物的進一步分離及單體的制備提供物質(zhì)基礎(chǔ)和科學依據(jù)；用HPLC法總黃酮圖譜鑒別大、中、小葉3種青天葵葉子,比較液相色譜圖來鑒別3種青天葵。通過分離提純實驗的研究,探索制備對照品方法,并得到了少量黃酮單體對照品。方法：在前期研究的基礎(chǔ)上,首先探索最佳的提取方法從青天葵中提取總

2、黃酮類物質(zhì)；并對其黃酮類物質(zhì)粗提物進行純化,篩選最佳分離條件；根據(jù)理化鑒別檢測其純化物中具有黃酮類物質(zhì)的理化特征,推斷出青天葵純化物是黃酮類。其次采用紫外-可見分光光度法對青天葵總黃酮進行含量測定。進而,采用鄰二氮菲-Fe2+氧化法、鄰苯三酚自氧化法、普魯士蘭法三種方法分別測定青天葵中總黃酮對羥自由基、超氧陰離子的清除能力及總還原能力。最后,用HPLC法總黃酮色譜圖鑒別大、中、小葉3種青天葵葉子,比較液相色譜鑒別3種青天葵。通過各種分離

3、提純實驗研究,探索制備對照品方法,得到了少量液相色譜圖中前峰黃酮對照品。結(jié)果：青天葵總黃酮的最佳提取工藝是取青天葵碎葉按95%乙醇溶液滲漉法提取,溶劑重復循環(huán)使用、藥材粒度為碎葉,浸泡時間24h,滲漉速度15ml·min-1,提取時間判斷,滲漉至滲漉液無鹽酸鎂粉反應為止,最佳純化藝是將提取物揮干后硅膠拌樣 吸附,采用石油醚,乙酸乙酯熱回流梯度提取。取乙酸乙酯部位浸膏上聚酰胺柱,洗脫劑先用水洗至無色,再用10%,30%,40%,50%,6

4、0%乙醇溶液,以3 BV/h速度洗脫,收集溶液,回收溶劑,減壓干燥得50%洗脫部分即可。50%部分總黃酮含量測定為89.29%,青天葵藥材中總黃酮含量為0.023%。并且,抗氧化實驗結(jié)果表明,青天葵總黃酮具有清除羥自由基和超氧陰離子的能力及一定的總還原能力。HPLC 法總黃酮色譜圖對照可以鑒別大中小葉3種青天葵葉子,容易區(qū)別,操作簡便,重復性良好。制備液相法制備得少量黃酮單體。結(jié)論：通過對青天葵總黃酮提取和純化工藝條件的篩選,得到了含量