蜂花粉中黃酮類物質(zhì)的提取及純化工藝研究.pdf

1、本文以油菜蜂花粉為研究對(duì)象,對(duì)花粉的破壁方法及其中黃酮類物質(zhì)的提取和純化工藝進(jìn)行了基礎(chǔ)研究。初步探明并比較了幾種花粉破壁方法和黃酮類物質(zhì)的提取工藝,為蜂花粉在食品、藥品等領(lǐng)域的開發(fā)和利用提供了相應(yīng)的工藝參數(shù)和科學(xué)依據(jù)。
　　 首先,進(jìn)行了花粉破壁技術(shù)的研究。以花粉的破壁率為指標(biāo),分別采用微波破壁法、溫差-超聲波復(fù)合破壁法和發(fā)酵破壁法,對(duì)花粉進(jìn)行破壁處理,系統(tǒng)研究了各種方法中的不同因素對(duì)花粉破壁率的影響。實(shí)驗(yàn)采用單因素實(shí)驗(yàn)及正交實(shí)

2、驗(yàn)設(shè)計(jì)對(duì)花粉的破壁工藝進(jìn)行了優(yōu)化。結(jié)果表明,微波破壁法的最佳工藝條件為:解凍時(shí)間8min、處理次數(shù)4次、解凍溫度60℃、微波功率540W;溫差-超聲復(fù)合破壁法的最佳工藝條件為:溫差為100℃、水浴時(shí)間7h、料液比1:10、冷凍時(shí)間24h,在功率為200W時(shí),超聲溫度60℃、超聲時(shí)間30min、溶液濃度5％;發(fā)酵破壁法的最佳工藝條件為:酵母液濃度10％、酵母液加入量1ml、培養(yǎng)時(shí)間4天。這三種方法的破壁率分別為:微波法85.53％,溫差-

3、-超聲波法88.53％,發(fā)酵法77.63％。
　　 其次,進(jìn)行了花粉中黃酮類物質(zhì)的提取工藝研究。以黃酮得率為指標(biāo),分別采用了水浴回流法、冷浸法、超聲波法和索氏提取法對(duì)花粉中的黃酮類物質(zhì)進(jìn)行提取,系統(tǒng)的研究了各因素對(duì)黃酮得率的影響。此部分實(shí)驗(yàn)采用單因素實(shí)驗(yàn)和響應(yīng)面分析法對(duì)花粉中黃酮類物質(zhì)的提取工藝進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果表明,水浴回流法的最佳提取條件為:料液比1:14,乙醇濃度87％,提取次數(shù)3次;冷浸法的最佳提取條件為:乙醇濃度92％,料

4、液比1:42,冷浸時(shí)間6d;超聲波法的最佳提取條件為:乙醇濃度80％,料液比1:31,超聲次數(shù)3次;索氏提取法的最佳提取條件:乙醇濃度95％,回流時(shí)間12h。上述幾種提取方法的黃酮得率分別為:水浴回流法3.330％,冷浸法3.180％,超聲波法3.249％,索氏提取法3.256％。
　　 最后進(jìn)行了花粉中黃酮類物質(zhì)的純化及產(chǎn)品鑒定。為得到純度較高的花粉黃酮,本文對(duì)花粉中黃酮類物質(zhì)的粗提液用大孔吸附樹脂法進(jìn)行純化處理。試驗(yàn)比較了9

5、種大孔樹脂的吸附等性能,結(jié)果顯示,LSA-20大孔樹脂對(duì)花粉中黃酮類物質(zhì)的吸附及解吸性能最好?；ǚ埸S酮類物質(zhì)的最佳純化條件為:吸附流速2ml/min,上樣液濃度0.310mg/ml,上柱量20ml,上柱液pH=5,加鹽量6mg/ml,解吸劑濃度80％,解吸流速0.8ml/min?；ǚ壑悬S酮產(chǎn)品的純度由31.7％提高到75.6％。
　　 對(duì)LSA-20大孔樹脂純化的產(chǎn)品進(jìn)行了鑒定,利用顏色反應(yīng)、薄層層析及高效液相色譜對(duì)純化產(chǎn)品中的