RNAi干擾Survivin基因?qū)Υ龠M(jìn)卵巢癌細(xì)胞凋亡作用的體外研究.pdf

1、 目的：增殖重組質(zhì)粒后,轉(zhuǎn)染至人卵巢癌Ov-1063細(xì)胞。通過RNAi技術(shù)干擾Survivin基因表達(dá),觀察并探討Survivin抑制后對(duì)Ov-1063細(xì)胞增殖及凋亡的變化。方法：1.增殖培養(yǎng)人卵巢癌Ov-1063細(xì)胞株,將重組質(zhì)粒(pTZU6+1-shRNA-survivin)、陰性質(zhì)粒(pTZU6+1)分別轉(zhuǎn)染至細(xì)胞株。2.采用AO/EB法染色靶細(xì)胞株,觀察細(xì)胞轉(zhuǎn)染后三組細(xì)胞的凋亡率,并做統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。3. 用膜聯(lián)蛋白V/PI(An

2、nexinV/PI)法染色Ov-1063細(xì)胞,采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)其凋亡情況。4.透射電鏡觀察Ov-1063細(xì)胞鏡下形態(tài)改變。結(jié)果： 1. 采用AO/EB法染色靶細(xì)胞株24h后,實(shí)驗(yàn)組可見大量凋亡細(xì)胞及少量死亡細(xì)胞,空白組和陰性對(duì)照組大部分細(xì)胞為正常癌細(xì)胞。2.用AnnexinV/PI法染色轉(zhuǎn)染細(xì)胞后,經(jīng)流式細(xì)胞儀顯示,轉(zhuǎn)染24h后,實(shí)驗(yàn)組Ov-1063細(xì)胞凋亡率為(16.81±1.29)%,陰性對(duì)照組為
(3.56±1.2