柑橘衰退病毒在褐色橘蚜體內(nèi)分布的初步研究.pdf

1、柑橘衰退病是由柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus，CTV)引起的一種嚴(yán)重威脅世界柑橘產(chǎn)業(yè)的重要病毒病害，該病毒主要通過蚜蟲和嫁接傳播。我國廣泛分布著CTV的各種株系和強力傳播媒介褐色橘蚜(Toxoptera citricida Kirkaldy)。隨著近年來我國柑橘產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)的調(diào)整，柚類、甜橙和雜柑的種植比例加大，造成莖陷點型衰退病在柚類和某些甜橙上的為害日益嚴(yán)重，逐漸成為柑橘生產(chǎn)中的突出問題。國外實踐經(jīng)驗證明，在C

2、TV強毒株和褐色橘蚜共存的地區(qū)，弱毒株交叉保護(hù)技術(shù)(Mild strain cross-protection MSCP)是防治柑橘莖陷點型衰退病最有效的方法。但是隨著褐色橘蚜發(fā)生面積的不斷擴(kuò)大，外來CTV莖陷點型強毒株已入侵到南美洲的委內(nèi)瑞拉、中美洲、和北美洲的美國加州、德克薩斯州等地，對當(dāng)?shù)卣谶M(jìn)行的弱毒株系交叉保護(hù)造成了極大威脅，因此研究褐色橘蚜傳播CTV的機(jī)理對防治柑橘衰退病具有極其重要的意義。
　　 目前關(guān)于褐色橘蚜傳播

3、CTV的機(jī)理仍不清楚，先前的研究已證明，蟲態(tài)、寄主類型、毒源構(gòu)成以及環(huán)境條件都會對其傳毒效率造成影響。近年的研究還顯示，褐色橘蚜取食CTV后，單頭蚜蟲的帶毒率很高，且傳毒能力高的CTV分離株在褐色橘蚜體內(nèi)的含量遠(yuǎn)高于中等和低傳毒能力的CTV分離株在褐色橘蚜體內(nèi)的含量。但是目前還未開展CTV在褐色橘蚜體內(nèi)各組織中分布的研究，因此本研究在比較了6個不同CTV分離株蚜傳能力的基礎(chǔ)上，運用反轉(zhuǎn)錄巢式聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Reverse transcr

4、iption-Nested-polymerase chain reaction，RT-Nested-PCR)技術(shù)對單頭褐色橘蚜的帶毒率，以及褐色橘蚜口針、頭部和腹部的帶毒情況進(jìn)行了檢測，同時運用免疫熒光標(biāo)記技術(shù)對褐色橘蚜體內(nèi)CTV進(jìn)行了熒光定位標(biāo)記。本研究為今后進(jìn)行褐色橘蚜傳毒機(jī)理的進(jìn)一步研究提供了基礎(chǔ)。
　　 主要研究成果：
　　 1.CTV強毒株CT3、CT30和立10-2，以及弱毒株CT77、141-4和立8-4的

5、單蚜傳毒率分別為6.25％、47.5％、10％、7.5％、31.25％和0％。褐色橘蚜對CTV強弱毒株的傳毒率不存在明顯的相關(guān)性；
　　 2.褐色橘蚜取食不同傳毒能力的4個CTV分離株后，其單蚜帶毒率為76.25％～90％，均高于各自的單蚜傳毒率；
　　 3.褐色橘蚜取食高傳毒率的CT30和低傳毒率的CT77后，其口針、頭部和腹部CTV的帶毒率差異不明顯；并且褐色橘蚜口針中CTV的帶毒率最高，其次為頭部、腹部；