貝西滑刃線蟲乙酰膽堿酯酶2基因克隆與功能研究.pdf

1、貝西滑刃線蟲不僅危害印度榕、木槿和非洲紫羅蘭等木本植物，還侵染水稻、草莓和玉米等草本植物，防治非常困難，對(duì)農(nóng)林植物危害嚴(yán)重。乙酰膽堿酯酶能夠降解乙酰膽堿，終止神經(jīng)傳遞對(duì)突觸后膜興奮的刺激作用，確保神經(jīng)信號(hào)正常傳遞。在生物神經(jīng)傳導(dǎo)中起關(guān)鍵性作用。在生物防治中，乙酰膽堿酯酶基因與害蟲抗藥性有密切關(guān)系。為了開發(fā)高效低毒防治貝西滑刃線蟲的生防制劑，本研究克隆到貝西滑刃線蟲乙酰膽堿酯酶2基因，通過原位雜交，發(fā)現(xiàn)該基因在貝西滑刃線蟲的咽部神經(jīng)環(huán)、肛

2、門神經(jīng)環(huán)和神經(jīng)干上均有分布。通過植物源農(nóng)藥篩選，根據(jù)加入助溶劑的可溶性和殺蟲效果，篩選出苦參堿的溶解性和殺蟲效果較好。通過RNAi沉默，首先RT-PCR檢測(cè)該基因已經(jīng)被沉默;其次對(duì)RNAi線蟲與正常線蟲表型觀察，無差別;再次用農(nóng)藥處理RNAi線蟲與正常線蟲，用農(nóng)藥處理RNAi線蟲存活率較低，24h、48h和144h存活率的差異顯著，72h、96h、120h、168h和192h差異極顯著，216h差異不顯著，正常線蟲和RNAi線蟲用水處理