枯草芽孢桿菌B411的綠色熒光蛋白標(biāo)記及其水體凈化作用的研究.pdf

1、本課題主要包括兩個方面的研究：(1)枯草芽孢桿菌B411的綠色熒光蛋白標(biāo)記。以質(zhì)粒pAD123為模板擴(kuò)增出綠色熒光蛋白基因(gfp)編碼序列，連接到枯草芽孢桿菌整合載體pAXc，構(gòu)建重組質(zhì)粒pAXc-gfp。pAXc-gfp線性化后轉(zhuǎn)化B411菌株，獲得重組子B412，以B412為指示菌投放入水體，利用其熒光標(biāo)記跟蹤檢測了B412在水體中的消長，結(jié)果表明B412在無抗生素壓力下能穩(wěn)定表達(dá)GFP蛋白，菌體在水體中能存活較長時間(＞16d)

2、，試驗期間菌數(shù)變化介于5.5×103cfu/ml～8.9×104cfu/ml之間。(2)枯草芽孢桿菌B411水體凈化作用的研究。人工模擬了水體老化的過程，分析了有機(jī)質(zhì)種類、有機(jī)質(zhì)濃度、溶氧、溫度、酸堿度、底泥及凈水微生物與水體老化的關(guān)系。研究了自然環(huán)境下投菌對水體老化的影響。結(jié)果表明，水體老化是有機(jī)質(zhì)、溶氧、溫度等各因素綜合作用的結(jié)果。有機(jī)質(zhì)種類與水體老化的關(guān)系：含蛋白質(zhì)豐富的水體，老化速度最快，含糖類豐富的水體，老化速度最慢。有機(jī)質(zhì)濃

3、度與水體老化的關(guān)系：在低溶氧下(＜=0.10mg/L)，有機(jī)質(zhì)濃度低于0.1‰時，水體不老化，有機(jī)質(zhì)濃度超過一定值(＞=0.2‰)時水體老化，且水體老化并不與有機(jī)質(zhì)濃度一一相關(guān)，老化順序依次為0.2‰、0.4‰、0.6‰、0.8‰和1.0‰：高溶氧下(＞=1.34mg/L)，有機(jī)質(zhì)濃度低于0.4‰時水體不老化，高于或等于0.4‰是水體老化有不同程度發(fā)生，老化順序與有機(jī)質(zhì)含量一一相關(guān)，依次為1.0‰、0.8‰、0.6‰和0.4‰。溫度與水

4、體老化的關(guān)系：溫度(15℃、20℃)較低能延緩或避免水體老化，較高溫度(25℃、30℃)時水體老化速度較快，第4天時水體開始變黑，20℃和15℃培養(yǎng)的水體在同一時間下幾乎無變化。pH與水體老化的關(guān)系：pH7.5時水體老化速度最快，第3天開始老化，偏堿(pH＞9.0)或偏酸(pH＜6.0)能延緩水體老化，第4天時才開始老化，pH6.0的水體較pH9.0的水體老化程度輕。底泥與水體老化的關(guān)系：底泥能促進(jìn)水體老化，底泥不滅菌的水體中，6天內(nèi)C

5、OD去除率達(dá)60.1％，高出不加底泥的水體18.6％。投菌量與水體老化的關(guān)系：投菌量為104cfu/ml和105cfu/ml時COD去除效果最好，去除率分別為90.1％和91.3％，明顯高于其它處理及對照。不同溶氧水平下投菌與水體老化的關(guān)系：高溶氧下投菌能促進(jìn)水體凈化，COD去除率75.9％，低溶氧下投菌會加速水體老化，在投菌后3、4天內(nèi)水體迅速變黑，COD去除率為45.7％，與低溶氧下對照COD去除率42.1％相差不大，且低于高溶氧水