電針加艾灸對AD模型大鼠海馬細胞周期調(diào)節(jié)因子cyclinD1、p16INK4a的影響.pdf

1、目的
　　 通過觀察電針加艾灸對阿爾茨海默?。ˋD）模型大鼠學(xué)習(xí)記憶障礙及海馬細胞周期調(diào)節(jié)因子CyclinD1和p16INK4a相關(guān)指標(biāo)的影響，從細胞周期的角度探討電針加艾灸改善AD模型大鼠學(xué)習(xí)記憶障礙和治療該病的作用機制，為臨床更有效防治阿爾茨海默病提供一定的實驗依據(jù)。
　　 方法：
　　 清潔級Wistar大鼠，雄性90只，適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，進行Y型水迷宮篩選，剔除不合格者（即反應(yīng)過于敏捷和過于遲鈍的大鼠）。

2、將合格的80只大鼠隨機分為4組，即正常組、假手術(shù)組、模型組、電針加艾灸組，每組20只。以大鼠雙側(cè)海馬分別注入Aβ1-42制備AD模型大鼠。造模完成后，電針加艾灸組大鼠針刺“百會”、“腎俞”穴，接韓氏疼痛治療儀（HANS-100A），選用連續(xù)波，頻率2Hz，留針15min，然后再于相同穴位上方2-3cm左右，采用直徑為6mm的定制艾條施以溫和灸，使穴位表皮溫度保持在43℃±1℃左右，每穴持續(xù)5min，每日1次，6日為1療程，療程間休息1日

3、，共2個療程。治療結(jié)束后第二天即開始進行Morris水迷宮實驗測試電針加艾灸對AD模型大鼠學(xué)習(xí)和記憶能力的影響，免疫組化測定大鼠海馬區(qū)CyclinD1和p16INK4a蛋白含量的變化，免疫印跡法檢測大鼠海馬區(qū)CyclinD1和p16INK4a蛋白表達強弱。
　　 結(jié)果：
　　 1.行為學(xué)實驗結(jié)果顯示:模型組大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力較正常組明顯降低，與正常組、假手術(shù)組比較均有顯著性差異(P＜0.05);定位導(dǎo)航實驗和空間探索實驗

4、結(jié)果來看，與模型組比較，電針加艾灸組大鼠平均逃避潛伏期時間明顯縮短，經(jīng)過水下平臺次數(shù)和有效停留時間有所增加，有顯著性差異(P＜0.05)。
　　 2.免疫組化檢測結(jié)果顯示:模型組大鼠海馬區(qū)CyclinD1蛋白陽性細胞數(shù)表達明顯增多，P16INK4a蛋白的陽性細胞數(shù)表達明顯減少，與正常組比較有顯著差異(P＜0.05);經(jīng)電針加艾灸治療后，CyclinD1蛋白陽性細胞數(shù)相應(yīng)減少，P16INK4a蛋白陽性細胞數(shù)相應(yīng)增加，較模型組，有顯

5、著性差異(P＜0.05)。
　　 3.免疫印跡檢測結(jié)果顯示:CyclinD1在模型組中的表達高于正常組和假手術(shù)組(P＜0.05)，而在電針加艾灸組中其表達量明顯減弱，與模型組比較有顯著差異(P＜0.05); P16INK4a在模型組的表達明顯低于正常組和假手術(shù)組(P＜0.05)，電針加艾灸治療后表達量明顯增高，高于模型組(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1.電針加艾灸能有效的改善AD模型大鼠的學(xué)習(xí)記憶功能。