版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內容提供方,若內容存在侵權,請進行舉報或認領
文檔簡介
1、背景及目的:
腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)是細胞能量調節(jié)的感受器。研究資料表明,AMPK激活劑二甲雙胍及AICAR可對多種腫瘤細胞產生增殖抑制作用,其功能與AMPK對細胞周期調控作用密切相關。目前有關AMPK激活劑對肝癌細胞增殖抑制、細胞周期影響的報道較少,未見詳細機制的報道。本研究將通過AMPK激活劑二甲雙胍及AICAR對肝癌細胞株HepG2的增殖抑制、細胞周期影響
2、及其作用機制的研究,為AMPK成為抗腫瘤治療的新靶點提供新的理論依據。
材料和方法:
1.用含10%胎牛血清,100U/ml青霉素和100U/ml鏈霉素的RPMI-1640培養(yǎng)基培養(yǎng)人肝癌細胞株HepG2細胞。
2.用含不同濃度二甲雙胍(2.5、5.0、10、20mM),AICAR(50、100、250、500μM)的培養(yǎng)基分別處理HepG2細胞24、48、72h,以未予藥物處理細胞為對照,噻唑藍比色法(M
3、TT法)檢測二甲雙胍及AICAR對HepG2細胞增殖的影響。
3. HepG2細胞用含10mM的二甲雙胍的培養(yǎng)基和500μM的AICAR的培養(yǎng)基作用72h,經碘化丙啶(PI)單染法,用流式細胞分析儀(FCM)檢測HepG2細胞周期情況。
4.用含10mM的二甲雙胍培養(yǎng)基和500μM的AICAR的培養(yǎng)基作用HepG2細胞24h, Western Blot檢測AMPK磷酸化程度、以及G1/S調節(jié)點細胞周期調節(jié)蛋白p21C
4、IP、p27KIP、cyclin D1、CDC2、CDK2表達量。
5. HepG2細胞用含10mM的二甲雙胍的培養(yǎng)基和500μM的 AICAR的培養(yǎng)基作用24h,DAPI染色后熒光顯微鏡下觀察HepG2細胞凋亡情況。
結果:
1. Western blot結果顯示,經二甲雙胍及AICAR處理后,HepG2細胞AMPK磷酸化程度較對照組增強。
2. MTT法檢測結果顯示,與對照組比較,二甲雙胍及A
5、ICAR能抑制HepG2細胞的生長,并且呈濃度和時間依賴性。
3.流式細胞術檢測結果顯示,HepG2細胞經二甲雙胍及AICAR處理24h后,細胞周期發(fā)生G0-G1期停滯,G0-G1期百分比和對照組相比較,差別具有統(tǒng)計學意義。
4. Western Blot結果顯示,經二甲雙胍及AICAR處理后,HepG2細胞p21CIP和p27KIP表達較對照組增強,cyclin D1表達較對照組減弱, CDK2、CDC2表達與對照
6、組比較無明顯變化。
5. DAPI染色觀察可見,HepG2細胞經二甲雙胍及AICAR處理24h后,鏡下可見部分細胞核碎裂,細胞發(fā)生凋亡。
結論:
1. AMPK激活劑誘導HepG2細胞增殖抑制。
2. AMPK激活劑誘導HepG2細胞發(fā)生G0-G1期細胞周期停滯。
3. AMPK激活劑磷酸化激活HepG2細胞AMPK,上調p21CIP、p27KIP表達量,下調cyclinD1表達量,CD
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網頁內容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內容的表現方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容,請與我們聯系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- AMPK激活誘導人食管癌細胞株細胞周期停滯和增殖抑制.pdf
- 姜黃素對人肝癌細胞株HepG2中p21WAF1-CIP1及p27KipI表達的影響.pdf
- CDK2-siRNA和Cyclin E-siRNA對肝癌細胞株HepG2細胞周期影響的研究.pdf
- 細胞周期蛋白cyclinD1和細胞周期調節(jié)因子p53參與鼻咽癌變的分子機制探討.pdf
- 姜黃素對HepG2人肝癌細胞株P53蛋白表達的影響.pdf
- 羅格列酮對人肝癌細胞株HepG2中p-p38MAPK及p-ERK1-2表達的影響.pdf
- 細胞周期調控因子cyclinD1、p27、p16在大腸癌中的表達.pdf
- 胚肝細胞誘導肝癌細胞株HepG2再分化中調控環(huán)路的重建.pdf
- 細胞周期蛋白p27和cyclinD1在胃癌中的表達及其臨床意義.pdf
- Mg LAMPs對人肝癌細胞株HepG2凋亡的誘導作用及其機制探討.pdf
- EGCG對人肝癌細胞株HepG2細胞增殖、凋亡和侵襲的影響.pdf
- 香葉木素通過調控p53信號轉導通路誘導人肝癌細胞HepG2細胞周期G2-M期阻滯.pdf
- RNAi CyclinE對肝癌HepG2細胞生長及細胞周期的影響.pdf
- 阿霉素對人肝癌細胞株HepG2中ABCB1表達的影響.pdf
- 犬cyclinD1的抗體制備及聯合p27kip抗體在犬乳腺腫瘤中的應用.pdf
- 生長抑素抑制人肝癌細胞株(HepG2)生長及對p16基因表達水平影響.pdf
- 三氧化二砷與阿霉素誘導人肝癌細胞株HepG2凋亡的實驗研究.pdf
- 檳榔堿對HaCaT細胞株CyclinD1及P16表達的影響研究.pdf
- 香葉木素通過調控p53誘導肝癌HepG2細胞凋亡.pdf
- 肝癌細胞HepG2株線粒體LETM1基因突變研究.pdf
評論
0/150
提交評論