2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語一試題真題（含答案詳解+作文范文）_第1頁
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的：構(gòu)建LETM1基因真核表達(dá)載體，并檢測(cè)肝癌HepG2細(xì)胞株的LETM1基因突變，探討線粒體LETM1基因在肝癌發(fā)生中的意義。
　　方法：從HepG2株細(xì)胞中提取mRNA及合成cDNA，設(shè)計(jì)并合成LETM1基因引物。用PCR方法擴(kuò)增LETM1基因，連接到真核表達(dá)載體pCMV-3Tag-6、pCMV-3Myc-2A上，構(gòu)建重組質(zhì)粒pCMV-3Tag-LETM1和pCMV-3Myc-LETM1。將質(zhì)粒進(jìn)行HindⅢ/XhoⅠ雙酶切

2、、測(cè)序和檢測(cè)突變位點(diǎn)。
　　結(jié)果：成功構(gòu)建了重組質(zhì)粒pCMV-3Tag-LETM1和pCMV-3Myc-LETM1；測(cè)序LETM1基因序列長(zhǎng)度為5462bp；肝癌HepG2細(xì)胞株的LETM1基因突變發(fā)生于G148A（纈氨酸→異亮氨酸）、G320A（甘氨酸→天冬酰胺）、G344A（精氨酸→組氨酸）、A1760G（賴氨酸→精氨酸）和A1825G（蘇氨酸→丙氨酸）。
　　結(jié)論：
　　1. LETM1基因突變最常發(fā)生于G148

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